最常用的初代培養有組織塊培養和分散細胞培養。組織塊培養是將剪碎的組織塊直接移植在培養瓶壁上,加入培養基後進行培養。分散細胞培養則是將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性最好的游離細胞,經典的方法是用蛋白水解酶(如胰蛋白酶和膠原酶)消化細胞間的結合物,或用金屬離子螯合劑(如EDTA)除去細胞互相粘著所依賴的Ca2+,再經機械輕度振盪,使之成為單細胞。
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