簡介
紙上層析是利用混合物中各組分在固定相和流動相中的溶解度不同而達到分離目的，常用濾紙作載體，濾紙上所吸收的水分作固定相，有機溶劑作流動相，稱展開劑。層析法有專用濾紙，也可用質量較好的普通濾紙代替。濾紙要清潔、均勻、平整，剪好的濾紙條沒有斜的紙紋，按一定規格剪成紙條備用。所用展開劑應對被分離物質有一定溶解度，通常為含一定比例水的有機溶劑。如分離甲基橙和酚酞可用水-正丁醇溶液作展開劑。
注意事項
操作時，先要點樣。取少量試樣，用水或易揮發的有機溶劑（如乙醇、丙酮等）使它完全溶解，配製成濃度約1％的溶液。在濾紙上距一端約2～3厘米處用鉛筆畫一記號作為原點，用毛細管或微量注射針筒吸取少量試樣溶液在原點滴一小滴，每滴試樣體積為0.002～0.02毫升，控制點樣直徑在0.3～0.5厘米左右。晾乾後再在原點處重複上述操作1～2次。將已點樣並晾乾的濾紙懸掛在層析槽內，並使濾紙下端（有點樣一端）邊緣浸入展開劑液面下約0.5～1厘米，但點樣的位置必須在展開劑液面之上，將層析槽蓋上。藉助於毛細現象，展開劑帶動試樣中各組分以不同速度沿濾紙逐漸向上移動，因各組分在固定相和流動相中溶解度不同，從而使混合物中各組分在流動相中移動距離不同而得到展開。有的組分展開後就可顯示出不同顏色，但有的組分展開後不顯色，還要進行顯色反應。一般可用顯色劑噴霧法使各組分顯色，如分離甲基橙和酚酞時用氨水作顯色劑，酚類可用三氯化鐵的乙醇溶液顯色，也有用紫外光照射顯色的。
