生物印跡

生物印跡(bio.imprint)是一種通過酶與配體問的相互作用、誘導,從而改變酶的構象的方法,其原理是利用酶在水溶液中的柔性,加人手性競爭性抑制劑,然後將這種酶一抑制劑複合物轉入親脂性溶劑,使酶的三維結構以一種改性的狀態被“凍結”,除去抑制劑的改性酶憑藉其“記憶”功能就具有了對底物的立體選擇性。

生物印跡(bio.imprint)是一種通過酶與配體問的相互作用、誘導,從而改變酶的構象的方法,其原理是利用酶在水溶液中的柔性,加人手性競爭性抑制劑,然後將這種酶一抑制劑複合物轉入親脂性溶劑,使酶的三維結構以一種改性的狀態被“凍結”,除去抑制劑的改性酶憑藉其“記憶”功能就具有了對底物的立體選擇性。
Russel等【35】提出的生物印跡的過程被廣泛地接受與套用。其過程如下:(1)將酶溶於含有其配體的緩衝溶液中,這一步使酶的構象被誘導而發生變化;(2)將此酶液冷凍乾燥形成酶粉,水分不經融化直接升華,可以固定酶的構象;(3)用有機溶劑沖洗凍乾的酶粉,除去印跡分子,即洗脫過程;(4)將有機溶劑沖洗過的酶粉過濾並真空乾燥。為了防止凍乾過程中酶的構象可能發生的變化,必須在此過程中加入可以維持酶結構的保護劑(如無機鹽、底物類似物等),來減輕甚至消除這種影響。

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