內容簡介
《環境微生物學實驗方法與技術》系統地介紹了環境微生物實驗研究中所涉及的基本原理和技術,內容注重基礎性和實用性。全書分四部分共十六章,包括基礎微生物實驗部分、微生物生態學實驗部分、環境微生物監測與評價實驗部分、污染物微生物處理與資源化實驗部分。基礎微生物實驗部分介紹了顯微技術、微生物製片和染色技術、培養基製作和消毒滅菌、微生物接種和培養技術及分離和鑑定技術、菌種保藏技術等;微生物生態學實驗部分介紹了環境因素對微生物生長與死亡的影響、土壤微生物生物量的測定技術、土壤微生物群落及其多樣性的研究方法等;環境微生物監測與評價實驗部分介紹了土壤、水體、空氣中微生物的監測方法,微生物毒理學監測方法等;污染物微生物處理與資源化實驗部分介紹了廢水處理中微生物的測定、廢水處理中活性污泥的培養與馴化、微生物對有機物降解性能的研究、固體廢物處理及廢物的資源化方法技術等。
目錄
第一部分基礎微生物實驗方法與技術
第一章顯微技術1
第一節常用顯微鏡的構造1
一、普通光學顯微鏡(general microscope)1
二、暗視野顯微鏡(暗場顯微鏡)(darkfield microscope)4
三、相差顯微鏡(phase microscope)5
四、螢光顯微鏡(Flurecence Microscope)6
五、電子顯微鏡8
第二節常用顯微鏡的使用方法及注意事項11
一、普通光學顯微鏡的使用方法及注意事項11
二、暗視野顯微鏡的使用方法及注意事項13
三、相差顯微鏡的使用方法及注意事項14
四、螢光顯微鏡的使用方法及注意事項14
第二章微生物製片及染色技術15
第一節微生物的製片方法15
一、壓滴標本製作無菌操作製片15
二、懸滴標本製作15
三、塗片法16
四、插片法16
五、搭片法16
六、玻璃紙法17
七、壓片法(也稱印片法)17
八、透明薄膜培養法17
九、單細胞菌塊17
十、其他方法17
第二節微生物染色技術及形態觀察17
一、染色基本原理及染料種類的選擇17
實驗21細菌單染色法及形態的觀察18
實驗22細菌的革蘭染色法20
實驗23細菌鞭毛染色及運動的觀察22
實驗24細菌芽孢、莢膜的染色及觀察24
實驗25放線菌活體染色及形態觀察26
實驗26黴菌的活體染色及形態觀察27
第三章滅菌與除菌29
第一節實驗室常用滅菌方法29
一、熱滅菌29
二、過濾除菌33
三、紫外線殺菌35
四、化學藥劑消毒與殺菌35
第二節各類培養基常採用的滅菌方法及注意事項37
一、各類培養基的滅菌法37
二、培養基滅菌的注意事項37
第四章培養基的配製39
第一節培養基的配製原則39
一、選擇適宜的營養物質39
二、營養物質濃度及配比合適39
三、控制pH值條件40
第二節培養基的種類及配置過程40
一、培養基的種類40
二、培養基的配製方法43
實驗41常用培養基的配置45
第五章微生物接種與培養技術48
第一節微生物的接種技術48
實驗51微生物的各種接種方法48
第二節微生物的培養技術51
一、微生物培養的一般問題51
二、好氣性微生物培養法52
三、厭氣性微生物培養法55
實驗52用厭氧袋法培養丙酮丁醇梭狀芽孢桿菌59
第六章微生物的分離及鑑定技術62
第一節微生物的純種分離方法62
一、稀釋混合倒平板法62
二、稀釋塗布平板法62
三、平板劃線分離法63
實驗61土壤微生物的分離技術63
第二節微生物生長的測定技術66
一、生長測定66
二、繁殖測定67
三、群體生長規律——生長曲線測定67
實驗62微生物菌體大小的測定方法68
實驗63微生物數量的測定70
實驗64微生物生長曲線的測定72
第三節微生物生理特徵測定技術73
實驗65微生物需氧性的測定73
實驗66微生物最適生長溫度的測定74
實驗67微生物生長pH值範圍的測定74
實驗68固氮能力的檢測75
第四節微生物生化特徵測定技術75
實驗69糖類發酵實驗75
實驗610甲基紅試驗76
實驗611澱粉水解試驗77
實驗612纖維素水解試驗77
實驗613果膠水解試驗78
實驗614細胞色素氧化酶試驗79
實驗615過氧化氫酶試驗80
實驗616TTC試驗80
實驗617硝酸鹽還原試驗81
實驗618α澱粉酶活力的測定方法82
實驗619蛋白酶活力的測定方法83
第七章菌種保藏技術86
實驗71菌種的保藏方法86
第二部分環境微生物生態學實驗方法與技術
第八章環境因素對微生物生長與死亡的影響93
第一節營養和氧氣對微生物生長發育的影響93
實驗81營養元素對微生物生長的影響93
實驗82氧和CO2濃度對微生物生長的影響95
第二節物理和化學因素對微生物生長發育的影響97
實驗83溫度對微生物生長的影響97
實驗84滲透壓對微生物生長的影響98
實驗85氫離子濃度對微生物生長的影響99
實驗86化學藥劑對微生物生長的影響100
第九章土壤微生物的生物量的測定方法102
實驗91土壤微生物生物量碳的測定102
實驗92土壤微生物生物量氮的測定104
實驗93土壤微生物生物量磷的測定105
實驗94土壤微生物生物量硫的測定107
第十章微生物多樣性的測定方法109
第一節PCR技術的基本原理與方法109
實驗101PCR擴增技術與方法110
實驗102微生物總DNA中的16SrDNA PCR擴增技術112
實驗103凝膠中DNA的回收、測序及系統發育樹的構建113
第二節微生物多樣性的測定方法114
實驗104Biolog分析方法115
實驗105PLFA分析方法117
實驗106PCRDGGE分析方法120
第三部分環境微生物監測與評價技術
第十一章水中微生物監測123
第一節水樣的採集和保存123
一、採樣123
二、樣品保存125
第二節水體中微生物數量的監測125
實驗111水中細菌總數的監測125
實驗112水中大腸菌群(Coliform group)的監測127
實驗113水中糞鏈球菌的監測136
實驗114水中病毒的監測139
實驗115水體沉積物中的H2S產生菌的測定141
實驗116循環水冷卻系統中有關的微生物監測142
實驗117套用PCR與基因DNA分子探針監測污染水體大腸桿菌146
實驗118富營養化湖泊中藻類的監測(葉綠素a法)149
實驗119PFU微型生物群落監測法151
第十二章土壤中微生物的監測155
第一節土樣的採集及保存155
一、土壤環境樣品採集155
二、樣品的處理與保存157
第二節土壤中微生物數量及組成的監測158
實驗121土壤中微生物數量的監測158
實驗122微生物在自然界氮素循環中的作用159
實驗123利用16SrDNA方法分析不同污染土壤中微生物種群的變化161
第十三章空氣中微生物的監測164
第一節空氣的採樣方法及保存164
一、樣品的採集方法164
第二節空氣中微生物數量的監測166
實驗131空氣中細菌數量的監測166
第十四章生物毒理學檢測與評價168
實驗141發光菌的生物毒性測試方法168
實驗142根據硝化細菌的相對代謝率檢測環境污染物的綜合生物毒性實驗171
實驗143採用細菌脫氫酶檢測化合物毒性——水質毒性快速測定儀法173
實驗144用Ames法檢測環境中致癌物176
第四部分污染物微生物處理與資源化技術
第十五章污染物微生物處理技術180
第一節廢水生物處理中的活性污泥180
實驗151活性污泥微生物的顯微鏡觀察及微型動物的計數180
實驗152活性污泥中絲狀微生物的鑑別186
實驗153活性污泥脫氫酶活性的測定190
實驗154活性污泥耗氧速率、廢水可生化性及毒性的測定193
第二節微生物在污染物降解中的套用195
實驗155光合細菌的培養及其對高濃度有機廢水的淨化作用195
實驗156酚降解微生物的分離和解酚能力的測定196
實驗157微生物對有機磷農藥的降解198
實驗158微生物對表面活性劑的降解200
實驗159微生物細胞的固定化及其在廢水生物處理中的套用202
實驗1510微生物吸附法去除重金屬203
實驗1511生物過濾法對含氨廢氣的處理205
第十六章固體廢物處理與資源化方法207
實驗161垃圾堆肥中纖維素分解菌的計數和分離207
實驗162利用酒精廢液生產單細胞蛋白208
實驗163固體廢物的固體發酵212
參考文獻214