簡介
激素檢測方法通常用的方法有免疫測定法，放射免疫測定法，受體結合測定法和血漿蛋白結合測定法。世界衛生組織根據其測定原理對蛋白結合測定法提出新的分類標準和統一命名。這些分類標準包括：①在測定中是否需要標記物；②標記的是被測物還是結合蛋白；③在測定系統中被測物過量還是結合蛋白過量；④測定的是被測物本身（直接法）還是結合蛋白（間接法）；⑤在測定系統中是否需要分離步驟。
主要類型
免疫測定法
不用標記物的蛋白結合測定法——免疫測定法 基於被測物（抗原）與其特異結合蛋白（抗體）結合時所出現的沉澱線作為測定指標的，在測定系統中加入的抗體是過量的。操作較為迅速和方便。但這一測定法只適應於測定大分子物質，被測物的濃度較高，只有這樣才形成能用肉眼看到的抗原-抗體複合物，這類方法套用較少。
放射免疫測定法
標記抗原的免疫測定法——放射免疫測定法 這是以標記抗原和未標記抗原與同一抗體的競爭性結合反應為基礎的。隨著未標記抗原增加，在反應系統中複合物中標記的抗原越來越少，因而在儀器上所測到的放射性記數也越來越少，由此可以作出一條標準曲線，並從標準曲線上查出被測樣品的含量。放射免疫測定法既能測定蛋白質類的大分子物質，也能測定半抗原一類的小分子物質。放射免疫測定法的靈敏度高，樣品用量少，並便於自動化操作。放射免疫測定法屬結合蛋白（抗體）限量測定，標記的是被測物（抗原），所以它屬於直接測定。
免疫放射計量測定法
標記抗體的免疫測定——免疫放射計量測定法 這是標記特異抗體。在反應系統中加入過量的標記抗體以便使全部被測抗原與之結合，然後，將結合和未結合的抗體分開。用吸附劑除去未結合的抗體，因此最後在儀器上測到的是結合型的抗體，這是一種間接測定，並且是一種過量蛋白結合試劑測定法。它與放射免疫測定法有本質上的區別。過量蛋白結合試劑測定法反應迅速，反應更為靈敏，但特異性較差。為了克服這一不足，有人發展了一種夾心麵包免疫放射計量測定法，大大提高了特異性和靈敏度。
非同位素標記的免疫測定 除用同位素作標記物之外，還有許多化合物可用作標記物。如酶、螢光素、病毒、金屬、紅細胞、乳酸和其他許多特異顯色顆粒。非同位素免疫測定的命名可按放射免疫命名的格式來表示。如：放射免疫測定、酶免疫測定、螢光免疫測定和病毒免疫測定等。
用非同位素標記抗體的免疫計量測定，也可仿照免疫放射計量測定法的命名來表示。如：免疫酶計量測定；免疫螢光計量測定。
抗體選擇
血液中類固醇激素檢測使用的抗體具有高度特異性，但大多數用於糞便中 類固醇激素檢測的抗體具有群體特異性，有相 同結合部位的所有激素代謝物都可以被檢測到。 雖然如此，在抗體選擇時需儘量選擇實 驗物種的特異性抗體，如果沒有，可以考慮近緣 物種的抗體。因為不同類群，甚至同一物種的 不同種群，類固醇激素的產物也可能不同，如在鳥類和小型哺乳動物中最主要的糖皮質激素是 皮質酮，而中大型哺乳動物及魚類中，主要的糖 皮質激素是皮質醇。
基本原理
免疫測定法：利用不同的標誌物與蛋白質的結合進行測定。基於被測物 與抗體結合時所出現的沉澱線，從而測定激素的含量到底有多少。操作較為迅速和方便。每一次聽法的適用範圍比較有限，通常只能測定大分子物質，能用肉眼看到的抗原-抗體複合物。
放射免疫測定法：通過對抗原的標記，來測定抗原抗體的結合物，形成同一抗體的競爭性的反應為基礎的。這種方法不僅能夠測蛋白質類的大分子物質，而且還能夠測定小分子物質。放射免疫測定法的靈敏度高，屬於直接測定。
免疫放射計量測定法：這一種標記抗體的特異性檢測。在反應系統中加入過量的標記抗體以確保能夠和反應物中的全部抗原結合。這是一種間接測定，反應迅速，反應更為靈敏。能夠適應於各種人群的檢測，其適應性也非常強。
