淋巴細胞分化抗原檢測

淋巴細胞分化抗原檢測是指利用特定的單克隆抗體檢測淋巴細胞表面分化抗原的方法。淋巴細胞分化抗原參與機體免疫反應或機體免疫記憶的形成,調節機體免疫反應的強弱,淋巴細胞分化抗原檢測可以評估免疫功能,對某些免疫性疾病的診斷有重要作用。

檢查前準備

向被檢測者解釋本操作的目的、方法等,消除顧慮;一般選取靜脈血進行檢測,採血前一天應清淡飲食、晚8點後避免進食和劇烈運動、避免飲酒以免影響結果,採血時避免情緒緊張。

操作方法

1.免疫組織化學染色法
(1)免疫螢光顯微技術:使螢光抗體與細胞表面的淋巴細胞分化抗原進行反應,洗滌除去游離的螢光抗體後,在螢光顯微鏡下觀察。
(2)免疫金銀染色技術:利用膠體金標記淋巴細胞分化抗原對應的特異性抗體,通過免疫反應使膠體金顆粒沉積在抗原位置,加入銀顯影液,用對苯二酚將銀離子還原成銀原子,被還原的銀原子沉積在膠體金顆粒周圍形成“銀殼”,最終在光鏡下就能看到被放大的黑褐色物質。易於辨別陽性物質,而且能檢測微量的抗原。
2.流式細胞術
利用螢光素標記的淋巴細胞分化抗原對應的單克隆抗體做分子探針,在流式細胞儀上檢測淋巴細胞分化抗原的表達,計數淋巴細胞分化抗原陽性細胞的百分率。

臨床意義

1.B淋巴細胞分化抗原
(1)CD5:表達CD5的B細胞可以被各種激活B細胞的試劑激活,在臍帶血、成人血和所有主要的外周淋巴樣器官中都可以發現。
(2)CD19:主要表達在B細胞上,在成熟的B細胞各個分化階段上有表達,在定向B細胞的祖細胞上也有表達,但在濾泡樹突狀細胞上只有弱的表達,因此它是鑑別泛B細胞最好的表面抗原標誌。
(3)CD28:在B細胞系列中,漿細胞顯著地表達CD28,在骨髓漿細胞和骨髓瘤細胞系中可以發現CD28。
(4)CD20、CD79:與免疫球蛋白有關,只有產生免疫球蛋白的細胞表達這兩種CD抗原,因而可用來區分B細胞和漿細胞的不同功能,CD20和CD79陽性時,患有B細胞性淋巴瘤的可能性大。
2.T淋巴細胞分化抗原
(1)CD1:在所有胸腺皮質中的胸腺細胞都可以檢測到CD1分子的表達,在激活的單核細胞和朗格漢斯細胞中也表達CD1。
(2)CD2:在T細胞發育的早期階段表達,由於抗CD2單克隆抗體可以激活早期T淋巴細胞祖細胞,因此CD2抗原可能出現在功能性T細胞受體表達之前,是胸腺細胞激活中可以利用的一種受體。
(3)CD3:在早期胸腺細胞和成熟T細胞中表達,與T淋巴細胞密切聯繫,這種抗原經常在急性T淋巴細胞白血病中表達。
(4)CD5:在所有的T細胞上都可以發現CD5抗原,它出現在T淋巴細胞個體發育的早期階段,在外周血和臍帶血中B細胞的一些細胞亞群上也可以檢測到CD5的存在。
(5)CD7:在T細胞個體發育的非常早期就會有所表達,但在T細胞成熟的最後階段這一抗原會丟失,CD7的功能還不清楚,單核細胞和NK細胞也表達這種CD7抗原。
(6)CD4和CD8:在抗原激活T細胞時,CD4和CD8作為一種共同的受體,CD4也是人類免疫缺陷病毒的受體。CD4陽性細胞數/CD8陽性細胞數比值降低見於愛滋病、惡性腫瘤等;CD4陽性細胞數/CD8陽性細胞數比值增高見於自身免疫性疾病、變態反應性疾病、器官移植排斥反應等。
(7)CD25:這種抗原表達在激活的T、B淋巴細胞上。
(8)CD28:表達在靜止的T細胞上,CD28是環孢菌素抵抗的T細胞表面受體,與信號傳導途徑有關。
(9)CD45:在所有的造血細胞中都有CD45的表達,缺乏CD45表達的T細胞對各種刺激都不會產生反應。

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