檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗沙丁胺醇抗原。檢測時,加入標準品或樣品溶液,沙丁胺醇抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的沙丁胺醇競爭性地與沙丁胺醇抗體結合後,再與酶標記物形成抗原抗體複合物,用TMB底物顯色;加入反應終止液,在450nm波長酶標儀下進行檢測,樣品中的沙丁胺醇濃度與吸收光強度成反比。
檢測範圍
本試劑盒是套用ELISA技術研發的藥物殘留檢測產品,與儀器分析技術比較,能經濟、快速地檢測出尿樣、肌肉、肝臟及飼料等中的沙丁胺醇。
交叉反應率
與類似物的交叉反應率:
沙丁胺醇 ……………………… 100%
鹽酸多巴酚丁胺…………………… 7.2%
西馬特羅………………………… 0.1%
克倫特羅……………………………3.6%
萊克多巴胺 ……………………… 0.2%
腎上腺素……………………………0.1%
異丙腎上腺素………………………<1%
去甲腎上腺素……………………<1%
四、試劑盒組成
酶標板1塊,96孔/板
標準液6瓶(1ml/瓶):0 、0.2ppb、0.6ppb、1.8ppb、5.4ppb、16.2ppb
抗體工作液 ………………………12ml
酶標記物 …………………………7ml
底物液A …………………………7ml
底物液B …………………………7ml
終止液 …………………………7ml
20X濃縮洗滌液 ………………40 ml
2X濃縮復溶液 ………………50 ml
說明書 ……………………………1份
需要但試劑盒中不提供的器材和試劑
設備
……微孔板酶標儀(450nm)
……振盪器、離心機
……微量移液器:20μl~200μl,100μl~1000μl
……容量瓶:100ml,500ml,1000ml
試劑
……氫氧化鈉、乙酸乙酯、正己烷、濃HCl、乙腈、異丙醇
溶液的配製
樣本前處理需配製:
配液1:1M 鹽酸溶液
取8.6ml濃鹽酸加蒸餾水定容到100ml
配液2:1M NaOH溶液
稱取4g氫氧化鈉加蒸餾水定容到100ml
配液3:復溶液1×
2×復溶液在使用前請按1:1稀釋
(1份濃縮復溶液+1份去離子水)
配液4:復溶液0.5×
2×復溶液在使用前請按1:3稀釋
(1份濃縮復溶液+3份去離子水)
配液5:洗滌液
將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用蒸餾水稀釋
(可按需配置)
樣本前處理方法
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都須注意:
(1)實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
(2)實驗之前須檢查各種實驗器具是否乾淨,必須使用潔淨實驗器具,以避免污染干擾實驗結果。
樣本處理步驟:
(A)尿樣、血清
取尿樣(若渾濁可以4000 rpm離心5分鐘,取清亮部分),取20μl進行分析。不用時應冷凍保存。
樣本稀釋倍數為1。
(B)組織
(C)飼料
試劑盒靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度:0.2ppb
樣本最低檢測限:
尿樣、血清………………………0.2ppb
組織………………………………0.2ppb
飼料 ……………………………20 ppb
回收率:
尿樣 …………………………90±10%
組織……………………………85±10%
飼料 …………………………85±15%
精密度:
試劑盒的變異係數均小於10%