內容簡介
本書是一部囊括電鏡方法學、病原物形態結構、細胞病理學三位一體的研究技術專著,內容源自作者35年的研究工作成果。共分兩部分。第一部分為病原微生物的電鏡觀察,包括植物病毒、昆蟲病毒、真菌病毒及類菌原體、類細菌體等,詳細分析了感病細胞的結構及各種胞器的病理變化,病原物在細胞內的分布形式與侵染區域位置的定位等。第二部分闡述電鏡制樣技術的關鍵因素分析及策略,結合電鏡方法學進行詳細的描述和解讀,包括負染技術、超薄切片技術、免疫電鏡技術、放射自顯影技術等。
本書收錄珍貴的植物病原微生物電鏡照片410多幀,文中提出了很多新的學術觀點,如病毒及內含體與細胞膜系統(胞質膜、液泡膜、內質網膜、核膜、線粒體膜等)在侵染與複製中相互間的關聯性,在菜豆畸矮病毒中發現世界最小的單鏈DNA病毒(直徑9~11nm)等。
本書內容原創度高,可供生物學、植物病理等領域從事電鏡學研究的人員閱讀參考。
目錄信息
第一章 土傳小麥花葉病毒的電鏡研究 / 001
一、概論 / 002
二、電鏡觀察 / 002
1.負染的病毒粒子(桿狀) / 003
2.單體細胞的放大 / 003
3.胞質內的病毒 / 003
4.病毒的縱橫切面 / 003
5.放大的病毒橫切 / 003
6.健株的葉綠體 / 004
7.病株的葉綠體 / 004
8.澱粉粒淤積 / 005
9.葉綠體多種病變形態 / 005
10.葉綠體片層解體 / 005
11.病健細胞核對比 / 005
12.細胞核畸變 / 006
13.結晶狀內含體 / 007
14.不定形體與髓鞘樣結構 / 007
第二章 唐菖蒲花葉病毒(北京分離株)的電鏡觀察 / 023
一、概論 / 024
二、電鏡觀察 / 025
15.負染的病毒粒子(特長桿狀) / 025
16.表皮細胞的不同變化 / 025
17.表皮細胞的局部放大 / 025
18.篩管細胞中的核損傷 / 025
19.胞質區的病毒分布 / 026
20.病毒與質膜、液泡膜的相關性 / 026
21.細胞核嚴重病變 / 026
22.細胞核解體,次生液泡增生 / 027
23.線粒體增殖、空泡化 / 027
24.結晶狀內含體 / 027
第三章 唐菖蒲花葉病毒(深圳分離株)的電鏡觀察 / 039
一、概論 / 040
二、電鏡觀察 / 040
25.負染的病毒粒子(線狀) / 040
26.內含體侵蝕核膜 / 040
27.多個細胞內的病毒及內含體 / 041
28.病毒內含體與線粒體 / 042
29.線粒體內外膜崩解 / 042
30.葉綠體、線粒體畸變 / 042
31.線粒體增生 / 043
32.線粒體、葉綠體嚴重損傷 / 044
33.細胞核崩解 / 044
34.病毒內含體侵入細胞核 / 045
35.細胞核畸形,核膜瓦解 / 045
36.病毒在胞質區的分布 / 045
37.結晶狀內含體 / 045
第四章 唐菖蒲花葉病毒(瀋陽分離株)的電鏡觀察 / 060
一、概論 / 061
二、電鏡觀察 / 061
38.負染的病毒粒子(線狀) / 061
39.多個細胞內的病毒及內含體 / 061
40.病毒、內含體與線粒體解體 / 061
41.病毒、內含體與葉綠體崩解 / 062
42.線粒體、葉綠體解體與不定形體、環狀物 / 062
43.多個細胞中線粒體受損 / 063
三、小結 / 063
第五章 大豆花葉病毒超微結構的研究 / 070
一、概論 / 071
二、電鏡觀察 / 071
44.負染的病毒粒子(線狀) / 071
45.完整的風輪內含體 / 071
46.管狀、捲軸狀內含體 / 072
47.帶狀、束狀內含體與病毒粒子 / 073
48.內含體在胞質內的分布 / 073
49.細胞核、葉綠體嚴重病變 / 073
50.風輪內含體侵入細胞核 / 074
51.細胞核內的不定形體、與液泡膜相融 / 074
52.線粒體畸變、大量增生 / 075
53.環狀內含體、髓鞘樣結構 / 075
第六章 四季參卷葉病毒的電鏡觀察 / 086
一、概論 / 087
二、電鏡觀察 / 087
54.完整的風輪內含體 / 087
55.病毒在細胞內的分布 / 088
56.核膜上見風輪內含體 / 088
57.細胞核畸變 / 089
58.葉綠體畸變 / 089
59.畸形的葉綠體、球狀體外溢 / 090
60.澱粉粒淤積,病毒侵染胞壁 / 090
61.葉綠體橫切面及多泡體結構 / 091
第七章 玉米矮花葉病毒的電鏡觀察 / 100
一、概論 / 101
二、電鏡觀察 / 101
62.特殊形態的風輪狀內含體 / 101
63.內含體在細胞內的分布形式 / 102
64.線粒體、葉綠體嚴重畸變 / 102
65.葉綠體崩解散落過程 / 103
66.細胞核的病變 / 103
第八章 木瓜環斑病毒的電鏡觀察 / 110
一、概論 / 111
二、電鏡觀察 / 111
67.負染的病毒粒子 / 111
68.篩管細胞中的風輪狀內含體 / 112
69.胞質內的風輪、捲軸、環狀內含體 / 112
70.質膜、液泡膜附近的病毒內含體 / 112
71.線粒體崩解與囊泡結構 / 113
72.細胞核、線粒體周邊的風輪狀、環狀內含體 / 113
73.細胞壁、胞間聯絲結構畸變 / 114
74.葉綠體片層結構解體,胞壁崩解 / 114
75.葉綠體片層結構異變及多層環狀結構 / 114
76.細胞結構破損及大量囊泡、環狀物 / 115
77.細胞核的嚴重病變 / 115
78.畸形的細胞核呈分枝狀 / 115
79.多層環的髓鞘樣結構 / 115
第九章 蠶豆萎蔫病毒的電鏡觀察 / 130
一、概論 / 131
二、電鏡觀察 / 131
80.負染的病毒粒子(球狀) / 131
81.病毒結晶聚集體 / 132
82.褪綠斑症狀區病毒聚集體 / 132
83.病毒聚集體形成的不同階段 / 132
84.褪綠斑症狀區的板式結晶體 / 132
85.病毒聚集體的形成過程 / 132
86.褪綠斑症狀區結晶狀內含體 / 132
87.細胞核內的病毒聚集體 / 133
88.病毒聚集體侵入細胞核,線粒體增生 / 133
89.核仁區見病毒粒子 / 133
90.病毒多種形式分布於胞質區及囊池、管狀結構 / 134
91.病毒聚集線粒體周圍 / 134
92.線粒體與多層環狀內含體的相關性 / 135
93.細胞中的高爾基體 / 135
第十章 花椰菜花葉病毒的電鏡觀察 / 151
一、概論 / 152
二、電鏡觀察 / 152
94.負染的病毒粒子(球狀) / 152
95.病毒以包含體形式存在於細胞中 / 152
96.包含體病毒與多泡體結構 / 152
97.包含體在細胞內的分布與胞間聯絲的相關性 / 153
98.細胞中的膜狀體結構 / 153
99.質膜系統受損,胞間聯絲畸變 / 154
100.多泡體與質膜系統的相關性 / 154
101.髓鞘樣結構的兩種形態 / 155
102.髓鞘樣結構與胞質膜、液泡膜的相關性 / 155
第十一章 菜豆畸矮病毒的電鏡觀察 / 166
一、概論 / 167
二、電鏡觀察 / 167
103.負染的病毒粒子(球狀) / 167
104.細胞核內的病毒粒子 / 167
105.完整的表皮細胞中病毒的分布,結構的變異 / 168
106.細胞核內大量的病毒顆粒及不定形體 / 168
107.細胞核、線粒體周邊密集大量病毒 / 168
108.核膜孔破裂,內質網增生、畸變 / 168
109.細胞核膜、線粒體內外膜密集大量病毒 / 168
110.病毒與組織內膜結構緊密相連 / 169
111.病毒在胞質區內不同的分布形式 / 169
112.呈長軌式排列的病毒 / 170
113.放大的病毒在細胞內的存在形式 / 170
114.病毒以疊加的形式形成結晶團塊 / 170
115.病毒密集於線粒體、液泡膜周邊,見髓鞘樣結構 / 170
116.液泡膜上密集病毒與結晶聚集體 / 170
第十二章 白粉虱體內菜豆畸矮病毒的電鏡觀察 / 185
一、概論 / 186
二、電鏡觀察 / 186
117.白粉虱唾腺體細胞結構 / 186
118.細胞結構的局部放大 / 186
119.彌散分布於胞質中的病毒 / 186
120.彎曲的管狀結構上排列著病毒 / 187
第十三章 香蕉花葉病的電鏡觀察 / 192
一、概論 / 193
二、電鏡觀察 / 193
121.負染色與組織切片中的病毒粒子(桿狀) / 193
122.免疫電鏡技術下的病毒形態特徵 / 194
123.感病細胞結構的病理變化 / 194
124.細胞核的畸變 / 194
125.細胞中呈三角形的結晶狀內含體 / 195
126.線粒體大量增生與六角形結晶狀內含體 / 195
127.輸導組織中的質膜體結構 / 195
第十四章 香蕉束頂病的電鏡觀察 / 204
一、概論 / 205
二、電鏡觀察 / 205
128.香蕉葉脈輸導組織中的BLO / 205
129.莖段輸導組織中的BLO / 206
130.分裂式繁殖的BLO / 206
131.類細菌體典型的細胞壁結構 / 206
132.BLO的不同形態 / 207
133.BLO二分裂式的繁殖方式 / 207
134.負染色的BLO顆粒 / 207
第十五章 交脈蚜體內類細菌體的電鏡觀察 / 216
一、概論 / 217
二、電鏡觀察 / 217
135.唾腺體內脂肪滴及不定形體 / 217
136.口器中的BLO顆粒 / 217
137.口器中多形態的BLO / 217
138.BLO顆粒的縱橫切面 / 217
第十六章 海帶葉卷病的電鏡觀察 / 222
一、概論 / 223
二、電鏡觀察 / 223
139.海帶葉部細胞全圖 / 223
140.海帶葉脈組織中多形態類菌原體 / 225
141.MLO袋狀式的聚集,從胞間聯絲中通過 / 225
142.二分裂式的繁殖過程 / 226
第十七章 棗瘋病的電鏡觀察 / 231
一、概論 / 232
二、電鏡觀察 / 232
143.韌皮部細胞MLO的分布情況 / 232
144.根部輸導組織中的MLO顆粒 / 232
第十八章 聚合草矮縮病的電鏡觀察 / 236
一、概論 / 237
二、電鏡觀察 / 237
145.篩管細胞中多形態的MLO顆粒 / 237
146.莖段表皮細胞中的螺旋絲狀體及分裂式繁殖過程 / 237
147.MLO顆粒從胞間聯絲中通過 / 237
148.細胞核的特異變化 / 238
第十九章 黃地老虎顆粒體病毒的超微結構 / 244
一、概論 / 245
二、電鏡觀察 / 245
149.脂肪體內顆粒體病毒的分布 / 245
150.病毒的形態結構組成 / 245
151.顆粒體病毒雙粒子核髓的排列方式 / 246
152.病毒在昆蟲體內裝配的全過程由病毒基質聚集開始 / 246
153.逐步形成病毒核髓 / 246
154.形成完整的病毒粒子,開始套裝蛋白外殼 / 246
155.顆粒體病毒裝配的全過程分解圖示 / 247
第二十章 大菜粉蝶顆粒體病毒的超微結構 / 255
一、概論 / 256
二、電鏡觀察 / 256
156.顆粒體病毒體內裝配的初始階段 / 256
157.形成病毒粒子 / 257
158.套裝蛋白外殼最後形成完整的病毒 / 257
159.病毒的形態特徵 / 257
160.雙粒子的包含體結構 / 257
161.顆粒體病毒縱、橫切面的標準圖像 / 257
第二十一章 感染病毒的小麥全蝕菌超微結構 / 265
一、概論 / 266
二、電鏡觀察 / 267
162.培養7天的小麥全蝕菌形態結構 / 267
163.培養20天的菌體結構 / 267
164.小麥全蝕菌形態結構特徵 / 267
165.菌體細胞核、核膜區出現破損 / 267
166.菌體的細胞壁結構特徵 / 267
167.菌體的垂直橫切面,見三層胞壁結構 / 268
168.個別菌體的胞壁1/2區段由兩層組成 / 268
169.病毒彌散分布於菌體線粒體與液泡內 / 268
170.病毒在液泡內呈串球式排列 / 268
171.病毒與液泡膜的密切相關性 / 268
172.菌體細胞隔板形成的初始階段 / 268
173.隔板形成的中期階段 / 269
174.隔板已完全形成,見沃羅寧體 / 269
第二十二章 用電鏡放射自顯影術研究TMV-RNA在菸葉細胞中的複製 / 283
一、概論 / 284
二、電鏡觀察 / 284
175.健康菸葉,細胞核,未見3H標記的沉澱物 / 284
176.健康菸葉,葉綠體,未見3H標記的沉澱物 / 285
177.健康菸葉,線粒體,未見3H標記的沉澱物 / 285
178.接種病毒6天后的感病細胞核見大量3H標記的沉澱物 / 285
179.病葉細胞核與葉綠體均見3H標記的沉澱物 / 285
180.病葉細胞中線粒體內未見3H標記的沉澱物 / 285
181.病毒顆粒密集區見少量3H標記的沉澱物 / 286
182.病毒顆粒的縱橫切面可見極少量3H標記的沉澱物 / 286
183.接種病毒48h後細胞核內同接種6天后的情況一樣 / 286
184~185.接種48h後經DNA酶處理,細胞核內仍見銀粒沉澱 / 286
186~189.經鏈霉蛋白酶E和RNA酶處理後細胞核、葉綠體、病毒聚集區內銀粒沉澱消失 / 286
第二十三章 電鏡制樣技術中的關鍵因素 / 303
一、概論 / 304
1.電鏡技術的套用價值及重要性 / 304
2.電鏡技術在植物病毒研究中的重要性 / 305
3.電鏡技術的局限性 / 306
4.電鏡技術中的兩大要點 / 307
5.電鏡技術與病毒症狀學的相關性 / 308
6.取材是電鏡技術中的第一關鍵 / 310
7.電鏡制樣技術的種類與功能 / 311
二、超薄切片技術及應注意的問題 / 313
1.戊二醛固定劑的特性與使用時的要點 / 313
2.四氧化鋨固定劑的特性與使用時的要點 / 314
3.混合固定劑和補充固定劑的使用要點 / 315
4.樣品固定中緩衝液的選擇及滲透壓的調節 / 316
5.固定過程中的洗滌(沖洗)問題 / 316
6.樣品脫水與置換的關鍵問題 / 317
7.樣品樹脂包埋技術中應注意的問題 / 318
8.切片過程中的若干問題應如何排解 / 320
9.超薄切片的染色 / 323
三、電鏡的負染技術 / 325
1.負染技術的形成及套用上的意義 / 325
2.快速浸沾技術的關鍵問題 / 326
3.病毒提純液的負染技術與提純技術相關性的探討 / 328
四、免疫電鏡技術(改進法) / 331
1.鋪展A蛋白酶膜 / 331
2.滴加抗血清 / 331
3.滴加病毒抗原(病毒提純液) / 331
4.滴加抗血清修復 / 331
5.雙氧鈾或磷鎢酸負染色 / 331
6.免疫電鏡圖像分析 / 331
五、電鏡放射自顯影 / 332
1.電鏡放射自顯影在植物病毒學研究中的作用與意義 / 332
2.電鏡放射自顯影的詳細方法 / 332
六、幾種特殊材料的電鏡制樣技術要點 / 335
1.禾本科植物及多年生果木的制樣技術要點 / 335
2.真菌材料的樣品製備要點 / 336
3.昆蟲材料的樣品製備關鍵要點 / 338
索引/ 341