朱古力平板培養基
朱古力平板培養基是一種微生物培養基,在醫學和生物研究等方面已經被廣泛使用。朱古力平板主要是用於奈瑟氏菌屬和嗜血桿菌等需氧菌的分離和培養。
檢驗原理
主要是蛋白腖和牛肉粉用來提供細菌生長所需的碳源、氮源胺基酸以及維生素。氯化鈉維持培養基中的滲透壓,瓊脂用做凝固劑。脫纖維羊血提供氯化血紅素和輔酶I,為嗜血桿菌屬的生長提供特殊營養。
朱古力平板培養基還能夠培養其他細菌,主要的原因還有血液中有V、X因子,這兩種因子是位於紅細胞中的,一般細菌不能利用,輕微的加熱(一般為75~85攝氏度左右)使紅細胞破壞釋放到細胞外方可利用。
主要成分
蛋白腖 | 10g |
牛肉粉 | 3g |
氯化鈉 | 5g |
脫纖維羊血 | 50mL |
瓊脂 | 15g |
蒸餾水 | 1000mL |
樣本要求
2~8℃儲存,防止冷凍,有效期3個月。
1、標本採集時應嚴格執行無菌操作,減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染。
2、盛標本容器須經滅菌處理,但不得使用消毒劑。
檢驗方法
1、復溫:取出培養基復溫至室溫;
2、接種:將取好的標本或菌株,採用劃線、塗布或者其他方法接種於培養基;
3、培養:將接種好的培養基作好標識,置於37℃±2℃培養箱中培養18~24小時,觀察結果。臨床標本應置於含有3~10%CO2的培養箱中培養18~24小時,觀察結果。
檢驗結果解釋
淋病奈瑟氏菌可形成灰白或粘液樣的小菌落,一般要在含有CO2的環境中才能正常生長。流感嗜血桿菌形成潮濕的珍珠樣小菌落(直徑約1mm),具有鼠臭。α-溶血的鏈球菌形成草綠色溶血環。朱古力平板為非選擇性培養基,大多數非苛養菌都可生長。
檢驗方法局限性
1、淋病奈瑟氏菌可形成灰白或粘液樣的小菌落,一般要在含有CO2的環境中才能正常生長。
2、流感嗜血桿菌形成潮濕的珍珠樣小菌落(直徑約1mm),具有鼠臭。
3、α-溶血的鏈球菌形成草綠色溶血環。
4、朱古力平板為非選擇性培養基,大多數非苛養菌都可生長。
性能指標
外觀:朱古力平板培養基應為朱古力色固體,表面平整,不得有裂痕。且培養基不得有肉眼可見氣泡及肉眼可見物(但允許有少量肉眼可見纖維)。
pH:7.2±0.2
無菌要求:將朱古力平板培養基置於37℃±2℃培養箱中培養7天,不得有菌生長。
質控菌生長:
菌株 | 生長情況 |
淋病奈瑟氏菌(ATCC 43069) | 生長良好,灰白或透明的粘液樣小菌落 |
流感嗜血桿菌(ATCC 10211) | 生長良好,潮濕的珍珠樣小菌落,具有鼠臭 |
肺炎鏈球菌(ATCC 49619) | 生長良好,灰白色圓形針尖樣菌落 |
注意事項
1、使用前如發現平板內培養基已經乾裂或染菌,請勿使用。
2、用於細菌純化、接種或計數時,請在潔淨的環境下操作,避免雜菌干擾。
3、開封后未使用完的培養基要及時放到冰櫃冷藏儲存,避免乾裂。
4、在冰櫃儲存較久的培養基容易出現較多的冷凝水,請在潔淨環境下將水傾出,然後在培養箱放置一段時間,待其表面乾燥之後再接種。
5、棄物處理:使用後應焚燒或高壓滅菌後按一般垃圾處理。
6、僅用於體外診斷。
7、僅用於專業人員。
8、本培養基含有動物來源的產品,產品和動物均已經過檢驗,但是不能保證無致病因子存在,應與潛在感染物同等對待本產品,採取正常安全措施處理本產品(不要肌膚接觸或攝入)。