明膠酶

明膠酶

明膠酶或稱Ⅳ型膠原酶屬於金屬蛋白酶家族成員,是能夠降解Ⅳ型膠原的特異的一種基質水解酶,其活性與腫瘤細胞侵襲和轉移密切相關,衡量藥物對腫瘤細胞金屬蛋白酶活性的影響是評價該藥物抗侵襲作用的一個重要方面。

原理

明膠酶明膠酶
明膠酶(gelatinase)或稱Ⅳ型膠原酶(typeⅣcollagenase)屬於金屬蛋白酶家族成員,是能夠降解Ⅳ型膠原的特異的一種基質水解酶,其活性與腫瘤細胞侵襲和轉移密切相關,衡量藥物對腫瘤細胞金屬蛋白酶活性的影響是評價該藥物抗侵襲作用的一個重要方面。人纖維肉瘤細胞HT1080能大量分泌分子量為72KD和92KD的兩種明膠酶。將藥液與腫瘤細胞金屬蛋白酶提取液共浴,用SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳法可將這兩種明膠酶按分子量大小分開,顯示兩條負染帶,根據帶的亮度和寬度可判斷藥物對金屬蛋白酶活性的影響,用於抗侵襲和轉移藥物的作用及機理研究。

作用

本金屬蛋白酶提取液主要含72KD和92KD兩種明膠酶,將金屬蛋白酶提取液電泳後,在反應緩衝液中加入藥物與膠條反應,經過足夠長時間的溫育後,加藥者負染帶不出現或減弱,則表明藥物對明膠酶活性有抑制作用。此外還可將膠壓膜處理後用雷射光密度計在633nm處對負帶掃描進行定量分析。

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