實驗室檢查
1.血型檢查
（1）ABO血型檢測：檢查夫妻雙方及胎兒的ABO血型，可初步判斷有無血型不合。妊娠者如為O型，配偶為A、B、AB型者，可能發生ABO溶血，應進行特異性抗體檢查。
（2）Rh血型檢測：妊娠者為Rh陰性，配偶為Rh陽性時，可能引起Rh溶血。
2.血清抗體檢查
常用的檢測方法有妊娠者的血進行釋放試驗、游離抗體試驗、紅細胞直接抗人球蛋白試驗（DAT）、母體ABO系統以外的抗體篩選及血清中IgG抗體效價測定。對妊娠者血清中IgG抗A或抗B效價>1:64且無流產病史及新生兒溶血病史時，可每4周檢查一次抗體濃度；ABO抗體效價≥1:256為可疑；ABO抗體效價≥1：512為高度可疑，如有既往史則建議行換血治療。Rh抗體效價≥1:8為可疑，建議複查；當Rh抗體效價≥1:16，可考慮羊膜穿刺術進一步檢測羊水膽紅素含量。
3.基因型檢查
從羊水、臍血或絨毛膜等處獲取胎兒組織細胞，通過聚合酶鏈式反應（PCR）測定胎兒血型基因可評估發生新生兒溶血病的機率。經皮臍血採樣及絨毛膜取樣會增加胎兒溶血、母體致敏、流產及死胎的可能，應慎重進行。
3.羊水膽紅素檢查
羊膜腔穿刺可獲得羊水，用分光光度計測定羊水在450mm處的光密度與羊水中膽紅素含量有關。根據孕周和羊水膽紅素ΔOD450區，可間隔1~2周重複穿刺對膽紅素水平進行監測，羊水膽紅素水平可更準確的反映胎兒受累程度。基於測定結果可選擇宮內輸血或終止妊娠。
4.新生兒相關檢查
（1）血常規檢查：血細胞分析可見血紅蛋白及紅細胞數量下降，網織紅細胞百分比常高於10%，重症者可見血小板減少。
（2）血塗片檢查：血塗片可見大量核紅細胞（>10個/100白細胞）。
（3）血液生化檢查：血清總膽紅素和間接膽紅素含量明顯升高，鹼性磷酸酶含量升高，血漿白蛋白含量下降。
（4）直接Coombs試驗：此試驗陽性結果有確診意義。ABO溶血症以“最適合稀釋度抗人球蛋白血清”作抗體釋放試驗可獲得陽性結果，Rh溶血症的Coombs直接和間接試驗均可呈陽性。
（5）抗體試驗：抗體釋放試驗是檢測致敏紅細胞的敏感試驗，也是確診試驗。游離抗體試驗有助於判斷患兒是否存在持續溶血或作為換血治療後評價指標。抗人球蛋白間接試驗（IAT）可明確抗體類型。抗體試驗可用流式細胞儀進行檢測，敏感度高、特異性強。
（6）凝血功能檢查：患兒可有出血時間延長，血塊收縮不良，纖維蛋白原（Fib）和凝血酶原降低。
（7）紅細胞乙醯膽鹼酯酶活性測定：ABO溶血時其活性明顯降低。
（8）尿膽原檢測：尿液及糞便中尿膽原均增加。如發生膽道阻塞，糞便可呈灰白色，尿膽紅素強陽性。
臨床意義
產前進行血型測定可初步了解是否可能發生新生兒溶血病，血型抗體效價、羊水膽紅素測定、基因檢測結合超聲檢查可較為明確的了解胎兒情況、評估新生兒溶血病發生可能性，為及時換血治療或終止妊娠提供決策依據。產後通過血型鑑定、抗體試驗、血液檢查等可明確診斷，了解病因，同時通過實驗室檢查動態監測血液指標可評估治療效果。因此新生兒溶血病的實驗診斷不僅可明確疾病診斷，同時可以為鑑別診斷、治療效果評價提供參考。
