常用方法
方法很多,常用的是先以濃石炭酸復紅加溫初染,隨即以鹽酸酒精或硫酸水脫色,最後用美藍液復染。如屬於抗酸細菌,呈紅色,因菌體有抗禦酸類脫色的特性,故能保持初染的紅色。如屬於一般細菌,則呈藍色,因菌體無抗酸能力,初染的紅色被酸類所脫去,故被復染成藍色。
分支桿菌的細胞壁有特殊的脂類物質——分枝菌酸,分支菌酸厚且呈蠟質,可以抵禦酸性酒精的脫色作用 。
抗酸染色的原理
分枝桿菌的細胞壁內含有大量的脂質,包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合後,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。
齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復紅牢固結合成複合物,用鹽酸酒精處理也不脫色。當再加鹼性美蘭復染後,分枝桿菌仍然為紅色,而其他細菌及背景中的物質為藍色。
注意事項
1.染色程度可通過改變染色時間或染色溫度做適當調整。
2.每次試劑用完後,請迅速蓋好,以免揮發。
3.石炭酸對皮膚、黏膜有強列刺激性和腐蝕性,使用時請穿實驗服並戴一次性手套操作 。