引起罐頭食品酸敗變質而又不胖聽(即產酸不產氣)的微生物在罐頭工業上稱為平酸菌。它是需氧芽胞桿菌科中的一群高溫型,具有嗜熱、耐熱的特點,其適宜生長溫度為45-60℃,最適生長溫度為50-55℃,在37℃生長緩慢,多數菌種在pH6.8-7.2生長良好,少數菌種能在pH5.0生長,廣泛分布於土壤,灰塵和各種變質食品中。造成罐頭食品平蓋酸敗的細菌,從微生物學分類來分,主要有二種:通常是嗜熱脂肪芽胞桿菌,凝結芽胞桿菌。
嗜熱脂肪牙胞桿菌:(Bacillus stearothermo philus)
革蘭氏陽性菌,能運動,周生鞭毛。芽胞橢圓形,亞端生或端生,通常使孢囊膨大,最高生長溫度65-75℃。能夠葡萄糖產酸,水解澱粉。
凝結芽胞桿菌:(Bacillus Coagulans)
革蘭氏陽性,能運動,周生鞭毛。芽胞椰圓形或柱狀,一次端生或端生,偶爾中生,有些菌株孢囊膨大不明顯,有些菌株的孢囊大。最高生長溫度55-60℃,最低生長溫度15-25℃。接觸酶陽性,葡萄糖產酸。
1.試樣製備:
罐頭樣品預先經55℃保溫一周,然後按正常方法進行開罐,吸取內容物液體1毫升,如為固體內容物則取1克,以無菌手續接種於3#培養基中,每罐接種2支。
2.增菌培養
接種試樣的3#培養基試管,於55℃培養48小時,如發現指示劑由紫變黃即判斷為陽性,同時進行塗片鏡檢為芽胞桿菌(有時不易檢到芽胞),如陽性需繼續培養48小時。
3.純分離培養
將陽性培養基試管劃線接種於3#培養基瓊脂平板55℃培養48小時,檢查有無可疑菌落(菌落黃色,周圍有黃色環,中心色深不透明),如有可疑菌落則接種於普通瓊脂斜面和芽胞培養基斜面,55℃培養24小時,塗片鏡檢觀察有無芽胞,以及芽胞的形狀及位置,並同時以普通瓊脂斜面培養物進行生化學試驗。
4.鑑別:
菌體形態:為革蘭氏陽性芽胞桿菌。
生化反應:取上項斜面培養物按下列項目進行鑑別。
平酸菌生化反應鑑別表
項目 菌別 | 60℃ 培養 | 硝 酸鹽 | 葡萄糖 | 靛 基質 | V-P 反應 | 7%NaCL 肉湯 | 檸檬酸鹽 | 酸性 胰腖 |
嗜熱脂肪芽胞桿菌 | 生長 | d + | + | - | - | - | - | 不生長 |
凝結芽胞桿菌 | 不定 | d- | - | - | + | - | b | 生長 |