定義
四級生物安全水平的最高防護實驗室的運作應在國家或其他有關的衛生主管機構的管理下進行。下列資料僅作為介紹性材料，有關四級生物安全水平實驗室發展的實質性工作，應與WHO 的生物安全規劃處 聯繫相關資料。
操作規範
除下列修改以外，應採用三級生物安全水平的操作規範：
1、實行雙人工作制，任何情況下嚴禁任何人單獨在實驗室內工作。這一點在防護服型四級生物安全水平實驗室中工作時尤其重要。
2、在進入實驗室之前以及離開實驗室時，要求更換全部衣服和鞋子。
3、工作人員要接受人員受傷或疾病狀態下緊急撤離程式的培訓。
4、在四級生物安全水平的最高防護實驗室中的工作人員與實驗室外面的支持人員之間，必須建立常規情況和緊急情況下的聯繫方法。
實驗室要求
三級生物安全水平的防護實驗室的要求也適用於四級生物安全水平的最高防護實驗室，但需增加如下幾點：
基本防護
必須配備由下列之一或幾種組合而成的、有效的基本防護系統。
—— Ⅲ級生物安全櫃型實驗室：在進入有Ⅲ級生物安全櫃的房間（安全櫃房間）前，要先通過至少有兩道門的通道。在該類實驗室結構中，由Ⅲ級生物安全櫃來提供基本防護。實驗室必須配備帶有內外更衣間的個人淋浴室。對於不能從更衣室攜帶進出安全櫃型實驗室的材料、物品，應通過雙門結構的高壓滅菌器或熏蒸室送入。只有在外門安全鎖閉後，實驗室內的工作人員才可以打開內門取出物品。高壓滅菌器或熏蒸室的門採用互鎖結構，除非高壓滅菌器運行了一個滅菌循環，或已清除熏蒸室的污染，否則外門不能打開。
—— 防護服型實驗室：自帶呼吸設備的防護服型實驗室，在設計和設施上與配備Ⅲ級生物安全櫃的四級生物安全水平實驗室有明顯不同。防護服型實驗室的房間布局設計成人員可以由更衣室和清潔區直接進入操作感染性物質的區域。必須配備清除防護服污染的淋浴室，以供人員離開實驗室時使用。還需另外配備有內外更衣室的獨立的個人淋浴室。進入實驗室的人員需穿著一套正壓的、供氣經HEPA 過濾的連身防護服。防護服的空氣必須由雙倍用氣量的獨立氣源系統供給，以備緊急情況下使用。人員通過裝有密封門的氣鎖室進入防護服型實驗室。必須為在防護服型實驗室內工作的人員安裝適當的報警系統，以備發生機械系統或空氣供給故障時使用。
進入控制
四級生物安全水平的最高防護實驗室必須位於獨立的建築內，或是在一個安全可靠的建築中明確劃分出的區域內。人員或物品的進出必須經過氣鎖室或通過系統。人員進入時，需更換全部衣服，而離開時，在穿上自己的日常服裝前應淋浴。
通風系統控制
設施內應保持負壓。供風和排風均需經HEPA 過濾。Ⅲ級安全櫃型實驗室和防護服型實驗室的通風系統有顯著差異：
—— Ⅲ級安全櫃型實驗室：通入Ⅲ級生物安全櫃的氣體可以來自室內，並經過安裝在生物安全柜上的HEPA 過濾器，或者由供風系統直接提供。從Ⅲ級生物安全櫃內排出的氣體在排到室外前需經兩個HEPA 過濾器過濾。工作中，安全櫃內相對於周圍環境應始終保持負壓。應為安全櫃型實驗室安裝專用的直排式通風系統。
—— 防護服型實驗室：需要配備專用的房間供風和排風系統。通風系統中的供風和排風部分相互平衡，以在實驗室內產生由最小危險區流向最大潛在危險區的定向氣流。應配備更強的排風扇，以確保設施內始終處於負壓。必須監測防護服型實驗室內部不同區域之間及實驗室與毗連區域間的壓力差。必須監測通風系統中供風和排風部分的氣流，同時安裝適宜的控制系統，以防止防護服型實驗室壓力上升。供風經HEPA 過濾後輸送至防護服型實驗室、用於清除污染的浴室以及用於清除污染的氣鎖室或傳遞室內。防護服型實驗室的排風必須通過兩個串連的HEPA 過濾器過濾後釋放至室外，或者在經過兩個HEPA 過濾器過濾後循環使用，但僅限於防護服型實驗室內。在任何情況下，四級生物安全水平實驗室所排出的氣體均不能循環至其他區域。如果選擇在防護服型實驗室內循環使用空氣，那么在操作中要極度謹慎，必須要考慮所進行研究的類型、在防護服型實驗室中所使用的儀器、化學品及其他材料，以及研究中所使用動物的種類。
所有的HEPA 過濾器必須每年進行檢查、認證。HEPA 過濾器支架的設計使得過濾器在拆除前可以原地清除污染。也可以將過濾器裝入密封的、氣密的原裝容器中以備隨後進行滅菌和∕或焚燒處理。
污水淨化消毒
所有源自防護服型實驗室、用於清除污染的傳遞間、用於清除污染的浴室或Ⅲ級生物安全櫃的污水，在最終排往下水道之前，必須經過淨化消毒處理。首選加熱消毒（高壓滅菌）法。污水在排出前，還需將pH 值調至中性。個人淋浴室和衛生間的污水可以不經任何處理直接排到下水道中。
廢棄物及滅菌
實驗室內必須配備雙門、傳遞型高壓滅菌器。對於不能進行蒸汽滅菌的儀器、物品，應提供其他清除污染的方法。
必須要有供標本、實驗用品以及動物進入的氣鎖室。
必須配備應急電源和專用供電線路。
必須安裝安全防護排水管。
由於安全櫃型或防護服型四級生物安全設施在工程、設計及結構方面的高度複雜性，這裡沒有給出此類設施的代表性圖片。
因為四級生物安全水平實驗室中工作的高度複雜性，應單獨制訂詳細的工作手冊，並在培訓中進行檢查。此外還應制訂應急方案。在制訂應急方案的準備過程中，應與國家和地方的衛生主管機構積極協作。同時，也要包括消防、警察、定點收治醫院等其他應急服務機構。
