拼音
huà zhuāng pǐn zhōng shuǐ yáng suān de jiǎn cè fāng fǎ
《化妝品中水楊酸的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發布。
1 適用範圍
本方法規定了採用液相色譜-紫外法測定化妝品水楊酸（CAS：69-72-7）含量的方法。
本方法適用於膚用產品和淋洗類發用產品中水楊酸含量的測定。
2 方法提要
樣品在經過提取後，經高效液相色譜儀分離，二極體陣列檢測器檢測，根據保留時間和紫外光譜圖定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。本方法對水楊酸的檢出限為0.0007μg，定量下限為0.002μg；取樣品0.25g，則檢出濃度為15mg/g，最低定量濃度為40mg/g。
3 試劑和材料
除另有規定外，所用試劑均為分析純，水為一級實驗用水。以下操作均在避光條件下進行。
3.1水楊酸，純度>99.0%。
3.2甲醇，色譜純。
3.3磷酸，優級純。
3.4氨水，優級純，含量25.0%~28.0%。
3.5甲醇水溶液：甲醇+水（75+25）。
3.6流動相的配製：
磷酸溶液：稱取11.5g磷酸（3.3），精確至0.01g，加入950mL水，用氨水（3.4）調節pH至2.3~2.5，加入水至1000mL。
流動相A液：量取磷酸溶液200.0mL，並用水稀釋至1000mL。
流動相B液：量取磷酸溶液250.0mL，並用甲醇（3.2）稀釋至1000mL。
3.7水楊酸標準儲備液（ρ=1.0g/L）：稱取水楊酸0.05g，精確到0.0001g，於50mL棕色容量瓶中，加入甲醇水溶液（3.5）溶解並定容至50mL，即得質量濃度為1mg/mL的水楊酸標準儲備溶液。避光保存，5日內穩定。
3.8系列濃度水楊酸標準溶液：配製質量濃度分別為5μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL和200μg/mL的系列水楊酸標準工作溶液。
4 儀器
4.1高效液相色譜儀：具有二極體陣列檢測器。
4.2分析天平：感量0.0001g。
4.3電子天平：感量0.01g。
4.4pH計：精度0.01。
4.5超音波清洗器。
4.6渦旋振盪器。
5 測定步驟
5.1樣品處理
稱取試樣0.25g，精確至0.001g，置於25mL具塞比色管中，加入甲醇水溶液（3.5）20mL，渦旋60s，分散均勻，超聲（功率：400W）提取15min，冷卻到室溫後，用甲醇水溶液（3.5）定容至25mL刻度線，渦旋振盪搖勻，混液過0.45mm有機系濾膜，濾液可根據需要用甲醇水溶液（3.5）進行稀釋，保存於2mL棕色進樣瓶中作為待測樣液，備用。避光保存，5日內穩定。
5.2色譜條件
色譜柱：耐酸性C8柱，250mm×4.6mmi.d.，5mm，或等效色譜柱；
流動相梯度洗脫程式：
| 時間/min | V（A液）/% | V（B液）/% |
|---|---|---|
| 0.0 | 80 | 20 |
| 10.0 | 10 | 90 |
| 15.0 | 10 | 90 |
| 15.1 | 80 | 20 |
| 20.0 | 80 | 20 |
檢測波長：300nm；
柱溫：25℃；
進樣量：20mL。
5.3測定
在5.2色譜條件下，取系列濃度的標準溶液（3.8）分別進樣，進行色譜分析，以系列標準溶液濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，進行線性回歸，建立標準曲線，得到回歸方程。取“5.1”項下處理得到的待測溶液進樣，根據測定成分的峰面積，代入回歸方程計算水楊酸的質量濃度。按“6計算”，計算樣品中水楊酸的含量。
5.4平行實驗
按以上步驟操作，對同一樣品獨立進行平行測定獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
6 計算
計算公式m——樣品取樣量，g；
r——測定成分的峰面積代入回歸方程計算所得的水楊酸質量濃度，mg/mL；
V——樣品定容體積，mL；
D——稀釋倍數（不稀釋則為1）。
7 回收率和精密度
方法的回收率為93.2%~106.3%，相對標準偏差小於4%（n=6）。
8 色譜圖
色譜圖