免疫親和層析

套用

親和層析的套用主要是生物分子的分離、純化。下面簡單介紹一些親和層析技術用於純化各種生物大分子的情況。

抗原和抗體

免疫親和層析免疫親和層析
利用抗原、抗體之間高特異的親和力而進行分離的方法又稱為免疫親和層析。例如將抗原結合於親和層析基質上,就可以從血清中分離其對應的抗體。在蛋白質工程菌發酵液中所需蛋白質的濃度通常較低,用離子交換、凝膠過濾等方法都難於進行分離,而親和層析則是一種非常有效的方法。將所需蛋白質作為抗原,經動物免疫後製備抗體,將抗體與適當基質偶聯形成親和吸附劑,就可以對發酵液中的所需蛋白質進行分離純化。抗原、抗體間親和力一般比較強,其解離常數為108-10?12M,所以洗脫時是比較困難的,通常需要較強烈的洗脫條件。可以採取適當的方法如改變抗原、抗體種類或使用類似物等來降低二者的親和力,以便於洗脫。
另外金黃色葡萄球菌蛋白A(ProteinA)能夠與免疫球蛋白G(IgG)結合,可以用於分離各種IgG。

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