前言
本標準由中華人民共和國衛生部提出並歸口。
本標準負責起草單位:中國疾病預防控制中心營養與食品安全所。
本標準參加起草單位:北京市疾病預防控制中心。
本標準主要起草人:楊大進、魯傑、王竹天、宋鳳英、羅仁才。
本標準為首次發布。
範圍
本標準規定了保健食品中番茄紅素的測定方法。
本標準適用於作為主要功效成分添加於保健食品中番茄紅素的測定。
當取樣量1.0g，定容至10mL，進樣量10μL時，檢出限（LOD）為3×10-4g/kg，定量限（LOQ）為1×10-3g/kg，線性範圍為0.200μg/mL~20.0μg/mL。
試劑和材料
乙腈：色譜純。
甲醇：色譜純。
二氯甲烷：分析純。
焦性沒食子酸：分析純。
N,N-二甲基醯胺：分析純。
番茄紅素對照品：純度≥95%，保存於-70℃冰櫃中。
焦性沒食子酸-二氯甲烷溶液：準確稱取5g焦性沒食子酸用二氯甲烷溶解並定容至100mL。
番茄紅素對照品溶液：準確稱量番茄紅素對照品1mg（精確到0.0001g），置於10mL棕色容量瓶中，加焦性沒食子酸-二氯甲烷溶液溶解並定容至刻度，混勻，此溶液臨用現配。由於番茄紅素不穩定，使用前可先用液相色譜歸一化法確定其純度。
1.乙腈：色譜純。
2.甲醇：色譜純。
3.二氯甲烷：分析純。
4.焦性沒食子酸：分析純。
5.N,N-二甲基醯胺：分析純。
6.番茄紅素對照品：純度≥95%，保存於-70℃冰櫃中。
7.焦性沒食子酸-二氯甲烷溶液：準確稱取5g焦性沒食子酸用二氯甲烷溶解並定容至100mL。
8.番茄紅素對照品溶液：準確稱量番茄紅素對照品1mg（精確到0.0001g），置於10mL棕色容量瓶中，加焦性沒食子酸-二氯甲烷溶液溶解並定容至刻度，混勻，此溶液臨用現配。由於番茄紅素不穩定，使用前可先用液相色譜歸一化法確定其純度。
儀器和設備
高效液相色譜儀：附紫外檢測器。
超音波清洗器。
分析步驟
試樣的製備
一般試樣的製備
根據試樣中番茄紅素的含量，稱取0. 5 g~2. 0 g均勻試樣(精確稱量至0. 001 g)置於25 mL棕色容量瓶中，加焦性沒食子酸一二氯甲烷溶液20 mL，超聲提取30 min後，加焦性沒食子酸一二氯甲烷溶液定容至刻度，搖勻，過0.45 μm濾膜。濾液備用。
微囊化試樣的製備
根據試樣中番茄紅素的含量，稱取0. 5 g~2. 0 g均勻試樣(精確稱量至0. 001 g)置於25 mL棕色容量瓶中，加0.2g焦性沒食子酸和5 mL N,N-二甲基甲酞胺後超聲提取30 min後，再用焦性沒食子酸一二氯甲烷溶液定容至刻度，搖勻，過0.45μm濾膜。濾液備用。
標準曲線的製備
分別吸取番茄紅素對照品溶液，用焦性沒食子酸一二氯甲烷溶液稀釋並在棕色容量瓶中定容的濃度分別為0.2，0.5，1.0，5.0，10.0，20.0 g/mL標準系列。
液相色譜參考條件
色譜柱:ODS C18柱或ODS C30柱(適用於番茄紅素幾何異構體的分離或含多種胡蘿蔔素試樣的分析),150 mmX4.6 mm,5μm。
柱溫:30℃。
紫外檢測器:檢測波長472 nm。
流動相:甲醇+乙腈=50+50。
流速:1. 0 mL/min。
進樣量:10 μL。
色譜分析:取標準溶液及試樣溶液注入色譜中，以保留時間定性，以試樣峰面積或峰高與標準比較定量。
1.色譜柱:ODS C18柱或ODS C30柱(適用於番茄紅素幾何異構體的分離或含多種胡蘿蔔素試樣的分析),150 mmX4.6 mm,5μm。
2.柱溫:30℃。
3.紫外檢測器:檢測波長472 nm。
4.流動相:甲醇+乙腈=50+50。
5.流速:1. 0 mL/min。
6.進樣量:10 μL。
7.色譜分析:取標準溶液及試樣溶液注入色譜中，以保留時間定性，以試樣峰面積或峰高與標準比較定量。
計算
試樣中番茄紅素的含量按式(1)進行計算:
保健食品中番茄紅素的測定….....…(1)
式中:
X—試樣中的含量，單位為克每千克(g/kg)；
c—根據標準曲線查得的番茄紅素的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL) ；
V—試樣定容體積，單位為毫升(mL)；
m—試樣質量，單位為克(g)。
計算結果保留三位有效數字。
精密度
在重複性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
色譜圖
在上述色譜條件下的色譜圖見圖1~圖2。
圖1 番茄紅素標準色譜圖