三聚氰胺是一種合成有機含氮雜環化合物，含氮量很高（達66%），加之其生產工藝簡單、成本很低，在採用凱氏定氮法測定粗蛋白時，可提高表觀粗蛋白含量；不法生產商為了降低生產成本，提高經濟效益，在原料奶及其它生產加工環節中非法加入三聚氰胺。一次大量攝入或長期攝入三聚氰胺會造成生殖、泌尿系統的損害，膀胱、腎部結石，並可進一步誘發膀胱癌。
【檢測原理】
該試劑盒採用免疫競爭法分析原理結合膠體金標記技術進行檢測。
【檢測範圍】
1、固體樣品：飼料、飼料原料、奶粉、蛋糕、奶茶粉等固態樣品。
2、液體樣品：液態生鮮奶、優酪乳、朱古力奶、咖啡奶等液態奶製品。
3、生鮮蛋類等。
【技術指標】 檢測下限：1.5-2 mg/kg
【檢測步驟】
1、樣品處理
固體樣品：向三聚氰胺試劑A瓶中加入2.0mL純淨水或蒸餾水，稱取粉碎的樣品0.5 g於三聚氰胺試劑A瓶中，搖動至少1分鐘後，靜置分層，取2mL上清液到5mL離心管中，加2mL三聚氰胺試劑B，混勻，待過固相萃取柱。
液體樣品：向試劑A瓶中加入0.5mL純淨水或蒸餾水，吸取液體樣品約1mL於三聚氰胺試劑A瓶中，搖動至少1分鐘後，靜置分層，取2mL上清液到5mL離心管中，加2mL三聚氰胺試劑B，混勻，待過固相萃取柱。
生鮮蛋類樣品：向三聚氰胺試劑A瓶中加入0.5mL純淨水或蒸餾水，將待測定的生鮮雞蛋蛋清打入玻璃杯內攪勻，用盒內吸管吸取約1mL樣品於三聚氰胺試劑A瓶中，搖動至少1分鐘後，靜置分層，取2mL上清液到5mL離心管中，加2mL三聚氰胺試劑B，混勻，待過固相萃取柱。
2、固相萃取柱處理
取出一支三聚氰胺固相萃取柱，用吸管向萃取柱中加入2mL三聚氰胺試劑B，用洗耳球在萃取柱上端加壓使液體呈滴狀自下端出液口勻速流出，流出液棄去。（注意：不要將柱內填料層的液體擠乾，應使柱內填料層保持濕潤狀態）
3、淨化
將步驟1中的待檢液分次加入已處理好的萃取柱中，用洗耳球加壓，使液體呈滴狀自下端出液口勻速流出，將萃取柱用洗耳球擠乾，然後用吸管向萃取柱中加2.5mL三聚氰胺試劑C，洗耳球加壓使三聚氰胺試劑C呈滴狀自下端出液口勻速流出，用5mL離心管接收流出液。然後用吸管向5mL離心管中加0.5mL三聚氰胺緩衝液，加1.75mL三聚氰胺試劑D，壓緊離心管蓋子，上下用力震盪50次以上，靜置2分鐘，待其自然分層，用吸管將上層溶液取出棄去，再用吸管向5mL離心管中加1.75mL三聚氰胺試劑D，壓緊離心管蓋子，上下用力震盪50次以上，靜置2分鐘，待其自然分層。
4、判斷：
用吸管吸取待檢樣品下層溶液，滴加3～4滴（約100μl）於加樣孔中，加樣後開始計時；結果應在10分鐘後讀取，其他時間判讀無效；
Ø 陰性: 測試線(T)比對照線(C)顏色深或一樣深，表明樣品中三聚氰胺的濃度小於1.5mg/kg。
Ø 陽性: 測試線(T)明顯淺於對照線(C)，或只有對照線(C),無測試線(T)，表明樣品中三聚氰胺的濃度大於1.5mg/kg。
Ø 無效: 對照線(C)和測試線(T)都不出現。或者對照線（C）不出現。
【注意事項】
Ø 試劑在4-30℃陰涼乾燥處常溫保存，有效期為1年。
Ø 三聚氰胺試劑B、C和D可固定使用對應的吸管，切忌交叉使用。5mL離心管、固相萃取柱不可重複使用。
Ø 液體在過固相萃取柱時，若發現堵柱現象時，相應的萃取柱作廢。
Ø 按“步驟1”吸取上清液時，吸管頭位於液面表層，以避免沉澱物吸入，從而導致萃取柱堵塞。
Ø 固相萃取淨化的過程中液體流速控制很重要，不可過快，應控制好在出口處液滴勻速下落。
Ø 生鮮奶在常溫下易酸敗，初篩應儘快進行。4℃冰櫃保存的生鮮奶48小時內應完成檢測。若產生局部結塊、發泡的變化，不可用於進行初篩。
Ø 提取和萃取時使用漩渦混合器，提取和萃取效果會更好。
Ø 如果檢測出疑是陽性樣品，建議在實驗室用儀器方法進一步確認。
Ø 在使用試劑時，必須注意安全，若不小心將試劑濺到皮膚上時，要立即用清水沖洗；
【三聚氰胺標準品配置方法】
Ø 三聚氰胺標準貯備溶液的配置：準確稱取100mg三聚氰胺標準品，用甲醇定溶到100mL容量瓶中，既是1000ppm三聚氰胺標準貯備溶液。
Ø 三聚氰胺標準工作溶液的配置：取適量三聚氰胺儲備溶液用蒸餾水稀釋既得三聚氰胺標準工作溶液。
【試劑盒裝箱單】
規格：20 樣/盒
名稱 | 數量 | 單位 | 名稱 | 數量 | 單位 |
三聚氰胺試劑A | 20 | 瓶 | 5mL離心管 | 40 | 個 |
三聚氰胺試劑B | 2 | 瓶 | 吸管 | 40 | 個 |
三聚氰胺試劑C | 1 | 瓶 | 三聚氰胺試劑D | 5 | 瓶 |
固相萃取柱 | 20 | 個 | 洗耳球 | 1 | 個 |
三聚氰胺緩衝液液 | 1 | 瓶 | 檢測板 | 20 | 個 |
說明書 | 1 | 張 |
