製備方法
1.靜脈抽血液10ml,置於無抗凝血酶的無菌試管中。
2.立即將試管以3000r/min離心10min。
3.靜置後,血液樣本可分為3層,在位於底層的紅細胞碎片和位於頂層的淡黃色澄清液體血小板血漿之間,取出中間層的淡黃色凝膠,即為富血小板纖維蛋白。
4.棄上清,去除凝膠狀物底部的紅細胞部分,獲得初級的PRF凝膠,再將其靜置於乾燥消毒的容器內10min,使其自然收縮並釋放其內的血清,或用無菌紗布吸附血清,同時經擠壓塑形製備出具有一定形態、彈性及韌性的富血小板纖維蛋白膜。
PRF用途
目前已廣泛套用於口腔科、頜面外科、骨科、整形外科等,以往主要製備成膜狀,用於創面的修復,現有學者研究將製備出的PRF凝膠與自體脂肪顆粒按一定比例混合,套用於自體脂肪隆胸等自體脂肪移植術中,提高自體脂肪的成活率。
相對於PRP(富血小板血漿)的優勢
1.相對於PRP,PRF的製備過程中未使用任何外源性添加物,避免了免疫排斥反應、交叉感染現象以及凝血功能障礙出現的風險,且其製備技術簡化,為一步離心,僅需在取血入離心管後迅速將其低速離心,玻璃離心管中的矽元素促成了血小板激活與纖維蛋白的生理性聚合,開啟了生理凝血過程的模擬而收集到天然凝血塊。
2.從超微結構來看,發現纖維蛋白網狀結構的構象不同是兩者相區別的主要結構特徵,它們在密度及類型兩方面存在明顯區別。纖維蛋白的密度由其原料纖維蛋白原的數量決定,其類型取決於凝血酶總量與聚合速度,在傳統PRP的製備過程中,未聚合的纖維蛋白原因溶解於PPP而直接被棄掉,因此在第三步加入凝血酶促凝血時,纖維蛋白原含量已大大降低,使聚合後的纖維蛋白網狀結構的密度遠低於生理血凝塊,由於外源性添加劑的作用,高凝血酶濃度使得纖維蛋白原的聚合速度遠高於生理反應,形成的纖維蛋白網由四分子纖維蛋白原聚合形成,僵硬而缺乏彈性,不利於網羅細胞因子及促進細胞遷移。因此PRF纖維蛋白網狀結構的成熟度優於PRP,與生理狀態更加接近。
3.PRF與傳統PRP製品的細胞因子釋放模式亦不相同,PRP製品由於外源性添加劑的參與,瞬間激活了PRP中的血小板,並且激活後釋放的細胞因子亦有起加速血小板激活作用的細胞因子,故其細胞因子的釋放在加入外源性添加劑的時點附近出現集中即使用後癒合期的早期階段,而後期的釋放較少,細胞因子的釋放並不均衡及持久。而由於PRF的結構優勢,使得細胞因子可以相對持久的釋放,更大限度地滿足了臨床需求。
4.雖然PRF及部分含白細胞的PRP產品能夠提供一定的免疫與抗感染功能,為組織再生與創口癒合提供了諸多優勢,但對比兩者的結構與性能,PRF接近生理狀態的特點使其能夠更好地發揮血小板濃縮物促進組織再生的生物學性能。