目的
在移植前檢查出不相合的供者,只能移植交叉配型相合的供者器官。
配型前準備
1.供者樣品
(1)使用供者新抽取的肝素化全血。
(2)從供者外周全血或淋巴結分離的淋巴細胞,成活率一定要高於80%。
(3)做Ⅰ類抗原交叉配型,可用全血淋巴細胞或T細胞;做Ⅱ類抗原交叉配型,可使用B細胞。
2.患者血清
(1)移植前一個月收集樣本,並冰凍保存。對已致敏或最近有抗原刺激,以及病史難以肯定的患者,應在移植前2天內收集血清。
(2)僅有冰凍保存的血清時,應使用對配組淋巴細胞反應最強的血清。
3.標記標準
(1)血樣必須各自標記清楚。
(2)未標記試管不可放入標記的容器中。
(3)多個試管不可捆在一起或用一個標籤。
(4)分開標記裝淋巴結或脾的小瓶。
4.材料與試劑
抗血清試驗板、新微滴試驗板、血清、石蠟油等。
操作方法
Ⅰ型抗原交叉配型方法:確定患者與供者的ABO血型,保證血型相合;向新微滴試驗板中的每個孔加入石蠟油,融化並徹底混勻所有凍存的血清。向微滴試驗板第1排的6個孔分別加入對照血清,並稀釋所有要交叉配型的血清;向第2排6個孔加入患者血清,向每個孔加入供者淋巴細胞懸液,室溫下放置30分鐘;向每孔加入兔補體,室溫下放置1小時。向每孔加入伊紅-Y溶液,放置3分鐘;然後再加入38%甲醛溶液,pH7.2~7.4,蓋上蓋子,使細胞靜置沉降30分鐘,看結果。
臨床意義
可直接判定供者與受者間實際的組織相容性程度。交叉配型為陰性可實施移植,交叉配型為陽性,則不宜進行移植,否則將發生急性或超急性排斥反應。