基本信息
核黃素即維生素B2,是由異咯嗪衍生而成的一種B族維生素。維生素B2分子由異咯嗪基和核糖醇基所組成,為黃色針狀晶體,味苦,微溶於水,極易溶於鹼性溶液。水溶液呈黃綠色螢光,對光不穩定。小麥、青菜、黃豆、動物的肝和心等內臟都富含維生素B2。醫學上套用維生素B2製劑治療維生素B2缺乏症。成人每天最低需要維生素B2 1.6毫克,兒童為0.6毫克。長期缺乏維生素B2,會導致細胞氏謝失調,首先受影響的是眼、皮膚、舌、口角和神經組織,引起眼角膜炎、口角炎、舌炎和陰囊炎等。
化學名稱:7,8-二甲基-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-四羥基戊基]-3,10-二氫苯並蝶啶-2,4-二酮
分子式:C17H20N4O6
相對分子質量:376.36(按2007年國際相對原子質量)
現行標準號:GB 14752—2010
中文標準號
標準號 StandardNo: GB 14752—2010
中文標準名稱 StandardTitle in Chinese: 食品添加劑 核黃素(維生素B2)
英文標準名稱: Food additive--Riboflavin (Vitamin B2)
發布日期 IssuanceDate: 2010-12-21
實施日期 ExecuteDate: 2011-2-21
首次發布日期 FirstIssuance Date: 1993-12-9
標準狀態 StandardState: 現行
計畫編號 Plan No:
代替國標號 ReplacedStandard:
被代替國標號 ReplacedStandard:
廢止時間 RevocatoryDate:
採用國際標準號 AdoptedInternational Standard No: FCC Ⅲ:1983
采標名稱 AdoptedInternational Standard Name:
採用程度 ApplicationDegree: NEQ
採用國際標準 AdoptedInternational Standard: 其他
國際標準分類號(ICS): 67.220.20
中國標準分類號(CCS): X42
標準類別 StandardSort: 產品
標準頁碼 Number ofPages:
標準價格(元) Price(¥):
主管部門 Governor: 國家標準化管理委員會
歸口單位 TechnicalCommittees: 全國食品添加劑標準化技術委員會
起草單位 DraftingCommittee: 中國醫藥工業公司
範圍
本標準適用於經化學合成法及生物發酵法製得的食品添加劑維生素B2(核黃素)。
規範性引用檔案
本標準中引用的檔案對於本標準的套用是必不可少的。凡是注日期的引用檔案,僅所注日期的版本適用於本標準。凡是不注日期的引用檔案,其最新版本(包括所有的修改單)適用於本標準。
技術要求
1、感官要求
符合表1 的規定。
檢驗方法:取適量樣品置於清潔、乾燥的白瓷盤中,在自然光線下,觀察其色澤和組織狀態,嗅其氣味。
約在280℃時熔融,分解,溶液易變質。在鹼性溶液中或遇光變質更快。
表1 感官要求
項目 | 要求 |
色澤 | 橙黃色 |
氣味 | 微臭 |
組織狀態 | 結晶性粉末 |
2、理化指標
應符合表2 的規定。
表2 理化指標
項目 | 指標 |
維生素B2(核黃素)(以乾基計),w/% | 98.0~102.0 |
比旋光度αm(20℃,D)/〔( º)·dm2· kg-1〕 | -120~-140 |
感光黃素的吸光度 ≤ | 0.025 |
乾燥減量,w/% ≤ | 1.5 |
灼燒殘渣,w/% ≤ | 0.3 |
重金屬(以Pb 計)/(mg/kg) ≤ | 10 |
砷(As)/(mg/kg) ≤ | 2 |
檢驗方法
本標準試驗方法中使用的部分試劑具有毒性或腐蝕性,按相關規定操作,操作時需小心謹慎。若濺到皮膚上應立即用水沖洗,嚴重者應立即治療。在使用揮發性酸時,要在通風櫥中進行。
本標準所用試劑除非另有說明,在分析中僅使用確認為分析純的試劑和GB/T 6682—2008 中規定的三級水。未指明的溶液為水溶液。試驗中所用標準滴定溶液和其他所需溶液,在未註明其他要求時,均按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603 之規定製備。
1、鑑別試驗
螢光試驗:
維生素B2(核黃素)具芳香環和雜環,有長共軛結構的π→π*躍遷,具有螢光性,在酸、鹼性條件下及加入各種還原劑均會使維生素B2(核黃素)轉變為無螢光的物質。
取約1mg 實驗室樣品,加100mL水溶解後,溶液在透射光下顯淡黃綠色並有強烈的黃綠色螢光;分成二份:一份中加鹽酸溶液或氫氧化鈉溶液,螢光即消失;另一份中加連二亞硫酸鈉少許,搖勻後,黃色即消褪,螢光亦消失。
紫外-可見吸收光譜鑑別:
維生素B2(核黃素)具苯環結構,有多個共軛雙鍵,其紫外-可見吸收光譜中有三個吸收峰(444nm,375 nm與267nm),用A444nm /A267nm 及A375nm /A267nm的比值來鑑別維生素B2(核黃素)。
實驗室樣品溶液:避光操作。取約0.075g實驗室樣品,精確至0.001g,置燒杯中,加1mL冰乙酸與75mL水,加熱溶解後,加水稀釋,冷卻至室溫,移置500mL棕色容量瓶中,再加水稀釋至刻度,搖勻;精密量取10mL,置100mL棕色容量瓶中,加7mL乙酸鈉溶液,並用水稀釋至刻度,搖勻。
取實驗室樣品溶液掃描,在波長444nm±1nm、375nm±1nm與267nm±1nm 處有最大吸收,並測定吸光度(A),計算A375nm/A267nm 的比值為0.31~0.33 和A444nm/A267nm 的比值為0.36~0.39。
紅外光吸收圖譜鑑別:
在紅外燈下進行,以防止吸潮。
將實驗室樣品和溴化鉀粉末置入瑪瑙乳缽中研勻,裝入壓片模具製備樣片並進行掃描。本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜一致。
2、維生素B2 的測定
維生素B2(核黃素)具苯環結構,有多個共軛雙鍵,在波長444nm 處有最大吸收,將樣品溶液於該波長處測定吸光度,以百分吸光係數(1%1cm E)計算即得其質量分數。
取實驗室樣品溶液,在波長444nm ±1nm處,以水為空白對照,測定吸光度(A)。
3、比旋光度的測定
維生素B2(核黃素)的核糖醇側鏈2,3,4-位有三個不對稱碳原子,具有旋光活性,在鹼性條件下,呈左旋光性,以此檢查樣品的比旋度。
取實驗室樣品溶液,按GB/T 613 測定。
4、感光黃素的測定
維生素B2(核黃素)幾乎不溶於三氯甲烷,雜質感光黃素溶於三氯甲烷,在440nm 處有紫外吸收,因此用三氯甲烷提取感光黃素,排除維生素B2(核黃素)的干擾後,在此波長處測定,作限量檢查。但維生素B2(核黃素)在乙醇中稍有溶解,為克服測定時的干擾,所以必須使用無醇三氯甲烷。
實驗室樣品溶液的製備:稱取約0.025g實驗室樣品,精確至0.0001g,加10mL無醇三氯甲烷,振搖5min,過濾。
測定:取實驗室樣品溶液,在波長440nm處,以無醇三氯甲烷為空白,測定吸光度(A)。
5、乾燥減量的測定
稱取約0.5g實驗室樣品,精確至0.0001g,置於105 ℃±2 ℃乾燥至恆重的扁形稱量瓶中,厚度不可超過5mm, 105 ℃±2 ℃乾燥至恆重。
6、重金屬的測定
樣品中雜質金屬在酸性(pH3.5)條件下,與硫化氫或硫化鈉試液顯色。樣品與標準鉛溶液同法測定,以此檢查其限度。
按《中華人民共和國藥典》2005年版二部附錄VIII H重金屬檢查法第二法測定,具體方法如下:取遺留的殘渣,加0.5mL硝酸,蒸乾,至氧化氮蒸氣除盡後(或取1.0g實驗室樣品,緩緩灼燒至完全炭化,冷卻至室溫,加0.5mL~1.0mL硫酸,使恰濕潤,用低溫加熱至硫酸除盡後,加0.5mL硝酸,蒸乾,至氧化氮蒸氣除盡後,冷卻至室溫,在500℃~600℃灼燒至完全灰化),冷卻至室溫,加2 mL鹽酸,置水浴上蒸乾後加15mL水,滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性,,再加2 mL乙酸鹽緩衝液(pH3.5),微熱溶解後,移置納氏比色甲管中,加水稀釋成25mL;另取配製實驗室樣品溶液的試劑,置瓷皿中蒸乾後,加2mL乙酸鹽緩衝液(pH3.5)與15mL水,微熱溶解後,移置納氏比色乙管中,加1mL±0.01mL標準鉛溶液,再用水稀釋成25mL;再在甲乙兩管中分別加硫代乙醯胺試液各2mL,搖勻,放置2min,同置白紙上,自上向下透視,甲管中顯示的顏色與乙管比較,不得更深。
7、砷鹽的測定
稱取5.0g±0.01g實驗室樣品、量取10mL±0.05mL限量砷標準溶液(每1mL溶液相當於1μg砷),分別按GB/T 5009.76—2003第一法中5.2.2乾灰化法處理試樣後,按第二法砷斑法檢測樣品。試樣的砷斑不得深於標準砷斑。