酶活性中心

殘基，而與DIFP作用的僅僅是其中的Ser195。 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的組成部分。 說明His57是活性中心的另一組成部分。

基本信息

概況

active center
酶分子中能夠直接與底物分子結合，並催化底物化學反應的部位，這一部位就成為酶的活性中心。
一般認為活性中心主要由兩個功能部位組成：第一個是結合部位，酶的底物靠此部位結合到酶分子上；第二個是催化部位，底物的鍵在此被打斷或形成新的鍵從而發生一定的化學變化。組成功能部位的是酶分子中在三維結構上比較靠近的少數幾個胺基酸殘基或是這些殘基上的某些基團，它們在一級結構上可能相距甚遠，甚至位於不同肽鏈上，而是通過肽鏈的盤繞、摺疊在空間構象上相互靠近；對於需要輔酶的酶來說，輔酶分子或輔酶分子的某一部分結構也是功能部位的組成部分。

基因

活性中心必需的基團有：組氨酸的咪唑基、谷氨酸天冬氨酸的側鏈羧基和絲氨酸的羥基。

鑑定方法

1）化學修飾法

觀察酶分子​被一定的化學試劑修飾前後酶活性的變化情況，結合其它方法，推斷該基團是否為活性​中心的功能基團。如胰凝蛋白酶與二異丙基氟磷酸（DIFP）作用即會失去活性。DIFP能與酶分子中的Ser殘基共價結合，胰凝乳蛋白酶中有28個Ser 殘基，而與DIFP作用的僅僅是其中的Ser195。這表明Ser 195是胰凝乳蛋白酶活性中心的組成部分。

2）親和標記法

是使用一個能與酶的活性中心特異​結合的正常底物類似物作為活性部位基團的標記試劑。該類似物不能為酶所催化而發生化學反應，卻能與酶的特定基團發生共價結合使酶失活。如N-對-甲苯磺醯苯丙氨醯氯甲基酮（TPCK）是胰凝乳蛋白酶的親和標記物，當用C14 標記的TPCK與胰凝乳蛋白酶一起保溫時，酶即失活。結構分析證明TPCK 與酶分子中的His57發生作用。說明His57是活性中心的另一組成部分。

3）X-射線衍射分析法

可直接觀察酶與底物的結合情況。