簡介
還原酶試驗又稱為色素還原試驗,主要方法有亞甲藍試驗(又叫美藍試驗)和刃天青試驗。日本一般採用後者。目的是為了判斷原料乳新鮮程度。通過測定顏色變化,間接推斷出鮮奶的衛生質量 。
亞甲藍試驗
試驗原理
亞甲藍試驗是用來判斷原料乳新鮮程度的一種色素還原試驗。新鮮乳加入亞甲基蘭後染為藍色。如污染大量微生物產生還原酶使顏色逐漸變淺,直至無色,通過測定顏色變化時間,間接推斷出鮮奶的衛生質量。
試劑
亞甲藍溶液:吸取5ml飽和亞甲藍的乙醇溶液,加入195ml水混勻,備用。
儀器
水浴鍋。
操作方法
吸取20ml牛乳,置於試管中,在水浴上加熱至38~40℃,加入1ml亞甲藍溶液,混勻後,將試管置於38~40℃恆溫箱中,經過20min、2h和5.5h觀察三次褪色情況,根據褪色時間將牛乳分為四個等級 。
結果
級別 | 乳的質量 | 褪色時間 | 每毫升牛乳相當於細菌數 |
1 | 合格 | 大於5.5h | 小於50萬 |
2 | 合格 | 2~5.5h | 50~400萬 |
3 | 不好 | 20min~2h | 400~2000萬 |
4 | 很壞 | 小於20min | 大於2000萬 |
刃天青試驗
試劑
刃天青溶液:稱取100mg刃天青(利色唑林),置於燒杯中,加煮沸過的水溶液,移入200mI容量瓶中,用水稀釋至刻度,濃度為0.05%。使用時用煮過、冷卻的水以1:10的比例將上述溶液稀釋即可。
儀器
水浴鍋。
操作方法
吸取10ml牛乳,置於25ml比色管中,加入刃天青工作溶液1ml,混勻,用滅菌橡膠塞塞好,但不要塞嚴,在38~40℃水浴中加熱5min,當試管加熱到57℃時,用膠塞把管口塞住,慢慢轉動試管,使之受熱均勻,用溫度計測定檢樣溶液溫度(可將溫度計放在對照組試管中測得),樣液溫度在57℃下維持60min。
經20min觀察後,記錄結果,拿去白色乳試管,將其他試管進行轉動,繼續放入水浴中保溫60min,記錄結果,試驗時試管應當避光。
試驗用試管需用160℃保溫1h,乾熱滅菌後,用無菌膠塞蓋緊。所用膠塞應在殺菌釜滅菌(壓力100kPa,保溫10min)或煮沸30min 。
結果
級別 | 乳的質量 | 乳的顏色 | |
經過20min | 經過60min | ||
1 | 良好 | 青藍色 | 青藍色 |
2 | 合格 | 青藍色 | 藍紫色 |
3 | 不好 | 青藍色或藍紫色 | 粉紅色 |
4 | 很壞 | 白色 | - |