簡介
植物組織培養即植物無菌培養技術,是根據植物細胞具有全能性的理論,利用植物體離體的器官如根、莖、葉、莖尖、花、果實等)組織(如形成層、表皮、皮層、髓部細胞、胚乳等)或細胞(如大孢子、小孢子、體細胞等)以及原生質體,在無菌和適宜的人工培養基及光照、溫度等人工條件下,能誘導出愈傷組織、不定芽、不定根,最後形成完整的植株的學科。
培養原理
植物組織培養的理論依據是細胞全能性學說。細胞全能性學說的內容為:植物體的每一個細胞都攜 帶有一套完整的基因組,並具有發育成為完整植株的潛在能力。在適當的條件下,植物的每一個細胞都 能分別分化和發育成不同的器官,發育成一個完整的植物體。
培養類型
(一)愈傷組織培養
愈傷組織培養就是將外植體接種在人工培養基上,由於植物生長調節劑的存在,使細胞脫分化形成 愈傷組織,然後通過再分化形成再生植株。
(二)器官和組織培養
器官和組織培養是通過培養器官和組織的類別來分類的。如果培養的是花葯,稱為花葯培養;如果 是胚珠,稱為胚珠培養;如果培養的外植體是葉,稱為葉培養;如果培養的外植體是莖,稱為莖培養。 總之,培養的是什麼器官或組織,就稱為什麼培養。本章介紹的組織培養即莖培養。
(三)細胞和原生質體培養
細胞培養是將植物的單個細胞分離出來,並進行培養。
培養調控
(1)光照:光照對離體培養物的生長發育具有重要的作用。通常對愈傷組織的誘導來說,暗培養 比光培養更合適。但器官的分化需要光照,並且隨著試管苗的生長,光照強度需要不斷地加強,才能使 小苗生長健壯,並促進它從“異養”向“自養”轉化,提高移植後的成活率。
(2)溫度:離體培養中對溫度的調控要比光照顯得更為突出。不同的植物有不同的最適生長溫度。
(3)濕度:組織培養中的濕度影響主要有兩個方面,一是培養容器內的濕度,它的濕度條件常可 保證?100%;二是培養室的濕度,它的濕度變化隨季節和天氣而有很大變動。培養室濕度過高過低都是 不利的,過低可能造成培養基失水而乾枯或滲透壓升高,影響培養物的生長和分化;濕度過高會造成雜 菌滋長,導致大量污染。因此,培養某些耗氧多的植物,採用通氣性好的瓶蓋、瓶塞或透氣膜封口的, 要求室內保持?70%~80%的相對濕度。濕度過高時可用除濕機降濕,過低時可用噴水來增加濕度。
(4)氧氣:植物組織培養中,外植體的呼吸需要氧氣。在液體培養中,振盪培養是解決通氣的有 效辦法。在固體培養中,對於某些耗氧多的植物要採用通氣性好的瓶蓋、瓶塞,或用透氣膜封口。對於 耗氧少的植物,組織培養中培養瓶內能維持正常的氧氣和二氧化碳循環,用密封性好的封口材料更能有 效地防止菌類污染。 此外,愈傷組織在培養基上生長一段時間後,由於營養物質的枯竭,水分的散失,以及一些組織代 謝產物的積累,必須將組織及時轉移到新的培養基上。這種轉移過程稱為繼代培養。一般在?25~28℃下 進行固體培養時,每隔?4~6周進行一次繼代培養。在組織塊較小的情況下,繼代培養時可將整塊組織轉 移過去。若組織塊較大,可先將組織分成幾個小塊再接種。
培養煉苗
組培苗的煉苗,煉苗即馴化,目的在於提高組培苗對外界環境條件的適應性,提高其光合作用的能力,促使組培苗 健壯,最終達到提高組培苗移栽成活率的目的。馴化應從溫度、濕度、光照及有無菌等環境要素進行, 馴化開始數天內,應和培養時的環境條件相似;馴化後期,則要與預計的栽培條件相似,從而達到逐步適應的目的。馴化的方法是將長有完整組培苗的試管或三角瓶由培養室轉移到半遮蔭的自然光下,並打 開瓶蓋注入少量自來水,使組培苗周圍的環境逐步與自然環境相似,恢復植物體內葉綠體的光合作用能 力,提高適應能力。馴化一般進行?3~5?周。 很多樹種也可不進行特別的馴化,或馴化與移栽同步。如桉樹試管苗直接移植後,通過遮蔭和加強 噴水、防病等,就能保證移植順利成活。
組苗防蟲害
(一)加強檢疫和消毒,防止外來病源侵染。
(二)提高栽培管理技術,提升蘭苗質量,增加蘭苗的自然抗逆性。整個栽培環境做到清潔、通風、偏強光照,促使蘭苗生長旺盛,自然會提高蘭苗抵禦病蟲侵擾的能力。
(三)加強日常巡視,發現有病害的組苗應及時銷毀,並進行藥物防治,將病害消滅在萌芽狀態。藥物防治可單獨葉面噴施並灌根,也可和肥料混施。
(四)對於蟲害,則可採取勤觀察、早發現、早防治的措施,對症用藥,如蝸牛可以用梅塔一類的誘殺劑進行誘殺,對介殼蟲則可以用25%的喹硫磷1000倍液直接噴殺,也可以用其他殺介殼蟲的專用藥物防治。
對於病蟲害,藥物防治是不得已而為之,平時在管理上應儘量作到植料清潔,不重複使用,儘量保持整個栽培環境的清潔和通風,減少病蟲害的發生。