背景
在飼料或水體中添加乳酸菌活菌或滅活菌製劑,可以提高水生動物的細胞免疫和體液免疫的能力。飼料中添加乳酸球菌,沙克乳酸桿菌等均可激活宿主的吞噬細胞,並且提高吞噬活性。 乳酸桿菌能合成動物所需要的多種維生素,如B1、B2、B6、B12、葉酸、煙酸和泛酸等。
最初研究發現,在乳酸乳球菌Lactococcus lactis、植物乳酸菌Lactoba-cillus plantarum和沙克乳桿菌Lactobacillus sake等乳酸菌中存在著調節細菌素合成的群體感應(quorum sensing, QS)系統。Gill等研究表明,25°C下丁香酚濃度為6mM是可插死沙克乳酸桿菌。
所產的細菌素
乳桿菌素S
L. sake產生的乳桿菌素S(lactocin S)屬於I型細菌素。I型細菌素又稱羊毛硫細菌素,是一類小分子的熱穩定、轉錄後修飾短肽,其最顯著特點是在形成過程中,發生了轉錄後修飾和加工,在分子內引入了稀有胺基酸,如羊毛硫氨酸、β-甲基羊毛硫氨酸、脫氫丙氨酸(DHa)和脫氫丁氨酸(DHb)等。這些胺基酸以共價橋形式在細菌素內部形成環狀結構。
細菌素sakacin P
細菌素sakacin P是一種非常有套用前景的防腐劑。它由沙克乳桿菌(Lactobacillus sakei)產生,對食品腐敗菌,尤其是對單核細胞增生李斯特氏菌有很強的抑菌活性。編碼細菌素sakacin P的基因(sppA)在沙克乳桿菌中受到嚴格的調控,因此由該菌分泌表達的細菌素sakacin P的產量很低且產物難於分離純化。本實驗採用重疊延伸PCR法(SOE-PCR)人工合成了sakacin P的結構基因,將該序列克隆入大腸桿菌並經異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG) 成功誘導表達後,隨即將細胞進行超音波破碎並離心,得到細胞上清液及沉澱物,最後用抑菌圈法測得細胞上清液具有顯著的抑制單核細胞增生李斯特氏菌活性,同時結果還表明低溫誘導有利於產生高活性的sakacin P細菌素。