小鼠單抗Ig類/亞類鑑定用ELISA試劑盒使用說明書
您好！感謝您選擇了我們的產品，請您在讀完此說明書後再開始您的實驗，這對您順利完成實驗很有幫助。
一、試劑原理：本試劑盒利用雙抗體夾心法鑑定小鼠淋巴細胞雜交瘤培養上清中單克隆抗體或特異親和純化的單克隆抗體的類和亞類（可區分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA）。採用小鼠抗體共有位點的二抗包被微孔板，與加入的培養上清中的小鼠抗體結合，再加入HRP標記的抗小鼠各類、亞類的抗體來分別反應，最後用TMB底物系統顯色並用稀硫酸終止，再通過酶標儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本試劑盒具有極高的解析度，是您鑑定小鼠單克隆抗體類、亞類的可靠工具。
二、組成成分：
| 酶標板 含自封袋1個 | 192孔 | 標本稀釋液 | 30ml |
| 通用陽性對照 內含小鼠 Ig（G1\G2a\G2b\G3\M\A） | 2ml | 顯色劑A | 20ml |
| 酶標二抗 6種 | 6×4ml | 顯色劑B | 20ml |
| 20×清洗液 | 50mL | 反應終止液 | 20ml |
| 封板膜 | 4張 | 說明書和加樣圖 | 各1份 |
三、使用範圍：用於小鼠單克隆抗體Ig類、亞類的鑑定以及相關內容的研究。
四、使用方法：
1、首先將試劑盒恢復室溫（大約30分），然後用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。
2、取出酶標板。每個標本需要6孔，陽性對照6孔。多餘的用自封袋保存，記得放入乾燥劑。
3、將細胞培養上清（或特異親和純化的抗體）50μl加入酶標微孔板，每個標本加6孔，陽性對照也是加6孔每孔50μl。然後每孔再加入50μl標本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內液體，洗板5遍後在不掉纖維的吸水材料上拍乾或機洗5遍。再在每個標本的6孔中分別加入6種酶標二抗各100μl，通用陽性對照的6孔也一樣。在加樣圖上或酶標板上做好標記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內液體，洗板5遍後在不掉纖維的吸水材料上拍乾或機洗5遍。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結果，看顯色藍的那個孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。更可將反應終止液（每孔50μl）終止反應後用酶標儀450nm測定波長，630nm參考波長雙波長測定結果，參看高值孔所對應的酶標二抗就知道此標本的Ig類或亞類。陽性對照0D小於0.5實驗無效，需要重做。
五、產品特點：高靈敏度、高特異性、結果容易判定。當然您如果覺得很多試劑自己可以準備想省一筆費用，那您可以登入網站選擇我們為您準備的簡裝抗體鑑定產品C030215。當然您也可以下次把標本交給我們來做並且不會增加太多費用！！
六、保存條件：2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過於頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。
七、注意事項：
1、雖然本試劑盒過期後很久還有使用價值但還是請您在有效期內使用。
2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬，雖然可以分辨但並不建議您這樣做。此類樣品成分十分複雜，有干擾結果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的C030215抗體鑑定試劑。它會給您帶來滿意的結果。
3、手洗板子時一定要把孔加滿，停留10秒然後棄盡，最後要拍乾淨。特別是在酶標二抗溫育後洗板時一定要把酶吸出而不是甩出，要吸淨。這個在手工洗板時對結果很重要。
4、一次沒用完的板子要帶乾燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5、拿放板子時不要劇烈抖動，以免孔間交叉污染出現錯誤結果。
6、出現異常結果請隨時諮詢我們。
特別提示：不具備ELISA基礎知識和操作的人員不要完成此實驗或類似實驗，因為這可能會給您帶來錯誤的結果和不必要的損失。
