檢查前準備
1.檢查前注意事項
(1)向患者及家屬解釋檢查的目的、時間和注意事項。
(2)採血前患者應避免劇烈運動和勞動,一般要求患者休息15分鐘後進行採血,冬季應使患者暖和後保持血液循環通暢再採集,以保證檢測結果的準確性。
(3)根據具體情況,儘量避免藥物干擾。
2.標本採集
通常採集靜脈血或末梢血直接製片。必要時以乙二胺四乙酸抗凝抽取靜脈血2ml製片,要求充分混勻,勿振盪,出現血凝塊的標本重新採集。
檢查方法
1.塗片製備
取新鮮血或抗凝血標本1滴置於載玻片的一端近處,推片以30°~45°均勻推成厚薄適宜,頭尾清楚,長度為3~5cm的血膜。
2.染色
細胞形態學一般選擇瑞氏染色、吉姆薩染色。將制好的血塗片放在染色架上,加瑞氏染液覆蓋整個血膜,靜置半分鐘左右;按1:1.2至1:1.5滴加磷酸鹽緩衝液,染色10~15分鐘;流水沖洗染液,待血片自然乾燥或用濾紙吸乾即可鏡檢。
3.顯微鏡形態學檢查
(1)低倍鏡檢查:①觀察染色是否滿意。②觀察塗片體、尾部細胞分布情況,細胞塗片不合格的需重新塗片檢查。③估計白細胞和血小板數量。④觀察有無幼稚細胞和寄生蟲。
(2)油鏡檢查:①觀察有無異常細胞及寄生蟲。②選擇體尾交界處分類100個白細胞,計算中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜鹼性粒細胞及異常細胞的百分比。②觀察血小板有無病理形態變化,計數血小板數量。③觀察紅細胞、白細胞的形態有無異常。
正常參考範圍
1.紅細胞形態學檢查
正常外周血成熟紅細胞無核,直徑6~9微米,雙凹圓盤形,瑞氏染色呈粉紅色,中央1/3處著色較淡。病理情況下常見紅細胞大小、形態、染色和結構的異常。
2.白細胞形態學檢查
(1)白細胞計數正常範圍是(4.0~10.0)×109/L。
(2)中性粒細胞占白細胞分類的50%~70%,細胞大小為10~15微米,呈圓形或卵圓形,核多分為2~5葉,核染色粗糙,無核仁,胞質豐富,含細小的紫紅色顆粒。正常情況下外周血中中性粒細胞桿狀核與分葉核的比值約為1∶13,病理情況下可出現核左移、核右移。
(3)成熟淋巴細胞呈圓形或卵圓形,藍色胞質,內有少量嗜天青顆粒。
(4)成熟嗜酸性細胞呈圓形或卵圓形,核呈鏡片狀,核染色質粗,胞質豐富,充滿橘紅色粗大、圓形的嗜酸性顆粒。
(5)成熟嗜鹼性粒細胞呈圓形、橢圓形或腎形,核染色質細緻,含藍黑色的嗜鹼性顆粒。
(6)成熟單核細胞呈圓形或不規則形,胞核不規則,核染色質粗糙、疏鬆,胞質呈淺灰色,胞質內可見細小如針樣淡紅色顆粒,原始單核細胞質內無顆粒。
3.血小板形態學檢查
正常血小板呈兩面微凸的圓盤狀,直徑1.5~3微米,呈小圓形,淡藍色或淡紅色,內有嗜天青顆粒。血塗片中常7~10個或以上,成小簇存在。
臨床意義
1.紅細胞形態學改變主要有大小、形態、染色異常及胞內出現異常結構如點彩紅、豪周小體,卡波環、有核紅細胞等。可見於貧血、骨髓增生異常綜合徵、紅白血病、骨髓纖維化、肝硬化、多發性骨髓瘤等疾病。2.白細胞形態學改變主要有數量的改變,中性粒細胞出現核左移、核右移、毒性變化及出現幼稚細胞等。
白細胞形態學檢查有助於急慢性白血病診斷、鑑別診斷及治療後緩解情況的觀察,可以了解感染的程度,提示各種血液相關性疾病。
3.血小板形態學改變主要有大小、形態、數量的異常,可見於貧血、特發性血小板減少性紫癜、白血病、骨髓增生異常綜合徵等。