反向斑點雜交
1989年由Saiki等提出了反向斑點雜交(reverse dot blot,RDB)技術,該技術是在PCR技術的基礎上進行了一個實用性的改進。Saiki及其同事在檢測HLA時提出了一個有效的改進,該方法是將靶基因在PCR過程用放射性元素標記,然後與尼龍膜雜交,從而檢測靶基因的突變情況。這一方法可將多個靶基因在同一條件下進行檢測從而大大提高了檢測的效率。隨後,其它科學家證實了該方法可以區分單個鹼基的突變,利用共價鍵的探針固定方法代替紫外交聯以及使用非放射性的生物素標記引物的方法,RDB技術的穩定性有了明顯的提高。Inogenetics的LiPA系列產品(通過CE認證)均是基於上述的原理。
從技術原理來說,RDB在本質上也是DNA晶片(一般是中密度晶片)的一種,但它不同於一般所說的玻璃DNA晶片,其信號特異性強,簡便易行,技術要求低,儀器設備投入小,檢測結果用肉眼就可直接判斷,而無需購買昂貴的雷射掃瞄器,更符合中國國情也更利於在基層醫院推廣。然而,截止2014年,RDB技術整個雜交過程的操作步驟比較多,操作時間也相對較長,成為大規模推廣套用的阻力。基於此需求,雖然已經有相應的自動化雜交儀出現,但自動化雜交儀的價格昂貴,並非普通的基層醫院可接受。而且,繁多的操作步驟,也對自動化儀器運行的穩定性提出了挑戰。
PCR-RDB:是將特異的探針分別固定到硝酸纖維素膜或尼龍膜上,再將經PCR特異性擴增的產物(在PCR引物5’端預先進行生物素標記,使擴增產物相應標記有生物素)與之雜交,這樣待檢樣本就會與具有同源序列的探針結合,經洗滌去除未結合的DNA樣本,由於待測的DNA樣本具有生物素類的標記物,結合了待測DNA的探針點上就帶有生物素類的標記物,再經相應的顯色反應就能顯出雜交信號。這種以膜上固定探針取代固定靶DNA的方式,一次雜交反應可以檢測多種靶序列,具有快速簡便、敏感度高和特異性強的特點。
關係資料庫
關係資料庫(Relational Database,RDB)就是基於關係模型的資料庫,也叫關係型資料庫 。在計算機中,關係資料庫是數據和資料庫對象的集合。所謂資料庫對象是指表、視圖、存儲過程、觸發器等。而管理關係資料庫的計算機軟體就是關係資料庫管理系統(Relational Database Management System,RDBMS)。關係資料庫是由數據表和數據表之間的關係組成的。在關係型資料庫中,表的關聯是一個非常重要的組成部分。表的關聯是指資料庫中的數據表與數據表之間使用相應的欄位實現數據表的連線。使用這種連線,無須將相同的數據多次存儲,這種連線在進行多表查詢時非常重要。
在關係模型中,實體以及實體間的聯繫都是用關係表示的。例如,系實體,學生實體,系與學生之間的一對多的聯繫都可以分別用一個關係來表示。在一個給定的套用領域中,所有實體和實體之間聯繫的關係模式集合構成一個關係資料庫的描述,稱作關係資料庫的內涵。
關係資料庫也有型和值之分,關係資料庫的型也稱為關係資料庫模式,是對關係資料庫的描述,包括若干域的定義以及在這些域上定義的若干關係模式。關係資料庫的值是這些關係模式在某一時刻對應的關係的集合,通常稱為關係資料庫稱關係資料庫的外涵。
rdb檔案
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