pda[馬鈴薯葡萄糖瓊脂]

Potato Dextrose Agar

（馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基）

培養基是按照生物生長繁殖所需要的各種營養，用人工方法配製而成的營養基質。其中含有碳源、氮源、無機鹽、維生素以及水分等，微生物在培養基上生長繁殖還必須在最適pH範圍內才能生長得更好。

培養基的種類很多，不同的微生物所需要的培養基不同。依物理性狀可分為液體的、固體的和半固體的三種。固體培養基是在液體培養基中加入1．5%--2%的瓊脂，半固體培養基是加入0．2%～0．5%的瓊脂。瓊脂又稱瓊膠或洋菜，是由海藻加工而成，其化學性質穩定一般微生物均不能分解利用。它在95℃熱水中溶化成溶膠，冷卻到45℃以下時又重新凝固，故一般實驗中常用它作為凝固劑。

根據營養物質來源的不同，培養基可分為天然、半合成和合成培養基三類。天然培養基是以自然界原有的有機物為材料經滅菌後製成，如馬鈐薯、胡蘿蔔水果、大麥粒、高粱粒等。半合成培養基中既有一些天然的有機物質，又有一些成分簡單或明確的化合物。如常用的馬鈴薯葡萄糖培養基(PDA)、肉汁腖培養基(NA)等。合成培養基是由一些成分明確的化合物配製而成的，無任何成分不明確的物質，常用於研究微生物的生理生化性狀，如查氏(Czapek)培養基等。

配製方法(1)稱量。稱量去皮馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15--20g。提示：瓊脂加入的量取決於瓊脂的質量，質量好的15g就夠了，質量差的

應適當增加。另外，在夏天氣溫較高時，適當增加用量。

(2)將馬鈴薯切成小塊，放入鍋中，加水1000ml，煮沸30min。用紗布濾去馬鈴薯殘渣。

(3)將馬鈴薯濾液放回鍋中，加入瓊脂，加熱熔化。

提示：在瓊脂熔化的過程中，需要用玻璃棒不斷攪拌，並控制火力不要使培養基溢出或燒焦。

(4)加入葡萄糖。葡萄糖溶解後，加入適量的水以補充加熱過程中損失的水分，定容至1000ml。

提示：通常在製作培養基的鍋內用紅藍鉛筆標記出不同體積的刻度，如1000ml、2000ml等，在定容時直接將水加至已標記的刻度即可。

(5)分裝。根據不同的實驗目的，可將配製的培養基分裝於試管內或三角瓶內。分裝試管，其量為管高的1/5，滅菌後製成斜面。分裝三角瓶的容量以不超過三角瓶容積之一半為宜。

(6)加塞。在管口或瓶口塞上棉塞。棉塞要用未脫脂的經彈松的棉花，棉塞可過濾空氣，防止雜菌侵入並可減緩培養基水分的蒸發，故在植物病理學研究工作中普遍使用。

正確的棉塞是形狀、大小、鬆緊與管口或瓶口完全適合，過緊時妨礙空氣流通，操作不便；過松則達不到濾菌的目的，且棉塞過小往往容易掉進試管內。正確的棉塞頭較大，約有1/3在外，2/3在試管內。分裝過程中注意不要使培養基沾染在管(瓶)口上以免浸濕棉塞，引起污染。如不使用棉塞也可用橡皮塞或特製的金屬、塑膠試管帽，為讓空氣可以自由進出，橡皮塞不要過緊，滅菌前應夾一紗線在管口。

(7)包紮。加塞後，將試管用線繩捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞，其外再用一道線繩紮好。用記號筆註明培養基名稱、配製日期、組別、製作人等。

(8)滅菌。將上述培養基以0．103MPa，121C，高壓蒸氣滅菌20分鐘。

(9)擱置斜面。將滅菌的試管培養基冷至5013左右(以防斜面上冷凝水太多)，將試管口端擱在玻棒或其他合適高度的器具上，擱置的斜面長度以不超過試管總長的一半為宜。

培養基經滅菌後，必須放在37C溫箱培養24h，無菌生長者方可使用。PDA培養基一般不需要調pH。對於要調節pH的培養基，一般用pH試

紙測定其pH。如果培養基偏酸或偏鹼時，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調節。調節時應逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過酸或過鹼破壞培養基成分。

提示：pH不要調過頭，以避免回調而影響培養墓內各離子的濃度。配製低pH的瓊脂培養基時，若預先調好pH並在高壓蒸汽下滅菌，則瓊脂因水解不能凝固。因此，應將培養基的成分和瓊脂分開滅菌後再混合，或在中性pH條件下滅菌，再調整pH。

Public Display of Affection

In the US, people are free to express their love for one another in public. They call it PDA, or Public Display of Affection.