1配置前準備：配置培養基新製備的milli water。調節pH值的酸鹼溶液也應該使用這種水配置。製備培養基的器皿清洗乾淨，並用milli water潤洗兩次。
2.溶解培養基：取5%終體積的milli water，加入到1L玻璃杯中，將乾粉培養基倒入燒杯，水洗包裝袋內面兩次，倒入培養液中。磁力攪拌助溶。
3.補加試劑：根據包裝袋說明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需胺基酸(可不加，10ml)。
4.加抗生素：一般抗生素終濃度——青黴素100U/ml，鏈黴素100U/ml。1L加入10m儲備液。
5.調pH值：加水到1000ml，然後用HCL或者NaOH調節pH到7.2。
6.過濾除菌：採用0.22um濾膜。過濾後分裝於小瓶中(100或200ml)。過濾後pH值一般上升0.1-0.3。
7.加小牛血清：根據培養基配置的量將小牛血清分裝，冷凍保存(-20度)。臨用前將加入小牛血清10%。
使用說明：
1、保存在2-8度乾燥環境，避光。
2、稱量出比最終容積小5%的蒸餾水，混合的容器儘可能接近最終容積。
3、將乾粉加入到室溫15到30度的水中，輕柔攪拌，勿用熱水。
4、沖洗出包裝袋內所有乾粉。
5、每升培養基加入2.2g碳酸氫鈉。
6、用水稀釋至最終的容積，攪拌直至溶解。不要過分混合。
7、調整pH值比最後的培養用的pH值要低0.2到0.3(過濾後pH值一般要升高0.1 到0.3)：用1N NaOH 和 1N HCl，邊攪拌邊緩慢添加。調整pH值完畢後，封閉容器，直至過濾。
8、立即用膜濾過消毒。
