目的建立HBV基因分型、耐藥變異以及前C區/BCP區突變檢測技術,為乙型病毒性肝炎診斷及監測提供依據。方法選取某院2010年1月～2011年1月收治的54例乙型病毒性肝炎患者的血清樣本,利用MassARRAYAssay和PCR技術對樣本進行耐藥基因檢測。結果①54例患者中B基因型28例(51.85%);C基因型22例(40.74%);B,C混合基因型2例(3.70%);無D基因型;B,C,D以外的其他基因型1例(1.85%)。②54例患者中,37例對拉米夫定耐藥,37例患者對拉米夫定耐藥的患者中,突變基因型均為B和C基因型。突變基因型主要是180M型(56.76%),無207I型,而且突變基因多見於C基因型,比例為72.97%,高於B基因型(27.03%),比較差異有統計學意義(P﹤0.05)。結論對拉米夫定耐藥的患者中,HBV-DNA突變基因型主要是180M型,而且多見於C基因型,MassARRAYAssay技術可以準確檢測HBV基因型及耐藥基因突變位點,可以為臨床診斷治療提供依據。
核苷(酸)類似物是目前臨床進行抗B型肝炎病毒(HBV)治療的主要藥物,但長期使用可引起病毒突變產生耐藥。基因型耐藥和表型耐藥分析是病毒耐藥性檢測的兩種基本手段,前者主要通過基因測序和線性反向探針雜交等方法檢測HBV基因組中已知與耐藥相關的病毒變異;後者則是確定"新發"與複雜HBV耐藥變異的必要方法,其基本策略是構建HBV變異株與野生株基因組重組載體,轉染細胞系後定量檢測HBV複製中間體,比較在不同藥物濃度下病毒複製力的受抑制程度。建立敏感、特異、經濟、高效的檢測方法是基因型耐藥和表型耐藥分析套用於臨床的基礎。我們近期的研究發現臨床存在恩替卡韋和阿德福韋多藥耐藥突變病毒株,HBV基因型/亞型與耐藥突變類型相關,耐藥病毒株可以傳播引起急性肝炎,rt229變異可以增強耐藥變異病毒株的複製力等,這些發現對深入揭示HBV耐藥變異的臨床特點、加強HBV耐藥管理具有重要意義。
