Cell Counting Kit-8
Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒或者CCK8試劑盒,是MTT法的替代方法。CCK8也是一種基於WST-8而廣泛套用於細胞活性和細胞毒性檢測的快速、高靈敏度試劑盒。
概述
CCK8屬於MTT的升級產品,該試劑可用於簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】。它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。與WST-8的關聯
CCK8試劑盒是基於WST-8而套用的。WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其
cck8驗證圖 它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去後續的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性範圍更寬,靈敏度更高。檢測方法對比
酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾。細胞毒性非常低,加入WST-8顯色後,可以在不同時間反覆用酶標儀讀數從而找到最佳測定時間。
細胞計數方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK8法 |
形成的formazan水溶性 | 差 | 好 | 好 | 好 |
產品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
使用方法 | 配成溶液後使用 | 現配現用 | 無需預製 | 無需預製 |
檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | 最短 |
檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
細胞毒性 | 高,細胞形態完全消失 | 很低,細胞形態不變 | 很低,細胞形態不變 | 很低,細胞形態不變 |
試劑穩定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
大批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
便捷程度
| 一般
| 便捷
| 便捷
| 非常便捷
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