縮寫
英文全稱:Baculovirus plasmid
中文解釋:桿狀病毒質粒,簡稱“桿粒”
提取
Baculovirus plasmid簡易提取方法:
挑白斑搖菌8h左右(一般會過夜搖),取2ml菌液,12000rpm ,30s,棄上清即可
1.溶液I—溶菌液:(加 300ul 將離心完的菌液混勻)
溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵,因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小於8時,溶菌酶作用受到抑制。
葡萄糖:增加溶液的粘度,維持滲透壓,防止DNA受機械剪下力作用而降解。
EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金屬離子,抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用(DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基);(2)EDTA的存在,有利於溶菌酶的作用,因為溶菌酶的反應要求有較低的離子強度的環境。
2.溶液II-NaOH-SDS液(加300ul ,裂解5min,輕柔混勻,最好不要拿槍吹,上下顛倒混勻就行):NaOH:核酸在pH大於5,小於9的溶液中,是穩定的。但當pH>12或pH