Bacmid

Bacmid

Bacmid, 是Baculovirus plasmid的縮寫。桿狀病毒質粒 [帶有桿狀病毒基因組的質粒,可在細菌和昆蟲細胞之間穿梭]

縮寫

最初獲得Bacmid策略圖 最初獲得Bacmid策略圖

英文全稱:Baculovirus plasmid

中文解釋:桿狀病毒質粒,簡稱“桿粒”

提取

Baculovirus plasmid簡易提取方法:

挑白斑搖菌8h左右(一般會過夜搖),取2ml菌液,12000rpm ,30s,棄上清即可

1.溶液I—溶菌液:(加 300ul 將離心完的菌液混勻)

溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌體細胞壁的主要化學成分肽聚糖中的β-1,4糖苷鍵,因而具有溶菌的作用。當溶液中pH小於8時,溶菌酶作用受到抑制。

葡萄糖:增加溶液的粘度,維持滲透壓,防止DNA受機械剪下力作用而降解。

EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金屬離子,抑制脫氧核糖核酸酶對DNA的降解作用(DNase作用時需要一定的金屬離子作輔基);(2)EDTA的存在,有利於溶菌酶的作用,因為溶菌酶的反應要求有較低的離子強度的環境。

2.溶液II-NaOH-SDS液(加300ul ,裂解5min,輕柔混勻,最好不要拿槍吹,上下顛倒混勻就行):NaOH:核酸在pH大於5,小於9的溶液中,是穩定的。但當pH>12或pH

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