酶切驗證

酶切驗證是酶切驗證是使用事先選定的一種或多種酶,對質粒進行酶切,通過凝膠電泳來判斷我們預期插入的目的基因是否連線到該質粒中。

定義:

酶切位點的選定:對於酶切驗證來說,選定好的位點至關重要,一般來說是選擇唯一的位點,最好雙酶切。就是說選擇的酶切位點在目的質粒上是唯一的,兩個唯一的位點雙酶切會產生掉帶,即是質粒線性化,同時會切掉片段,通過凝膠電泳圖來判斷所切掉的片段是否和預期的大小一致,如一致可以斷定目的基因已經插入該質粒中。例如:NdeI 和 BamHI 雙酶切鑑定。

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