藥物說明
貝母素乙（Peiminine）
【產品名稱】貝母素乙
【英文名稱】Peiminine
【別名】Sipeimine, Fritillarine, Imperialine, Zhebeinone
【分 子 式】C27H43NO3
【分 子 量】429.63522
【C A S 號】18059-10-4
【化學分類】Alkaloids生物鹼類
結構式【規 格】>98%
【性狀】white powder
藥物分析
貝母素乙的測定—薄層掃描法
套用範圍： 本方法採用雙波長薄層掃描法測定黃氏響聲丸中貝母素乙(C27H43NO3)的含量。
本方法適用於中成藥黃氏響聲丸。
方法原理： 供試品加乙醚-氯仿-乙醇，過濾，濾渣用同樣的混合溶液沖洗，合併濾液和洗液，蒸乾殘渣用氯仿溶解，製成供試液，點樣、展開，以碘化鉍鉀溶液顯色，用薄層掃瞄器進行掃描，于波長λS=516nm，λR=650nm測量貝母素乙(C27H43NO3)吸收度積分值，計算其含量。
試劑： 1. 乙醚
2乙醇
3. 氯仿
4. 碘化鉍鉀溶液
5. 乙醇
6. 濃氨水
7. 醋酸乙酯
8. 石油醚
9. 甲醇
儀器設備： 1. 儀器
1.1 雙波長薄層掃瞄器
1.2塗布器
應能使吸附劑在玻璃板上手工或自動塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。
1.3點樣器
一般採用微升毛細管或與之相應的點樣器材。
1.4展開室
可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。
2材料
2.1玻板
用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規格，要求光滑、平整，洗淨後不附水珠，晾乾。
2.2吸附劑
矽膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。
試樣製備： 1. 對照品溶液的製備
取貝母素乙對照品，加氯仿製成每lmL中含0.5μg的溶液，作為對照品溶液。
2. 供試品溶液的製備
取供試品適量，去糖衣，研細，過篩，取l0g，精密稱定，加適量硅藻土混合，加7-l0μL濃氨水濕潤，置於100mL量瓶中，加混合溶液乙醚-氯仿-乙醇(25:8:2.5)50mL，混勻，超聲處理30min，冷浸過夜，過濾，濾渣用混合溶液(同上)10mL沖洗三次，合併濾液和洗液，自然揮乾，加氯仿少許使殘渣溶解並定容至2mL，搖勻，作為供試品溶液，同法製備不含貝母的陰性對照液。
註：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟： 1.薄層板製備
將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡後，倒入塗布器中，在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.25～0.5mm）取下塗好薄層的玻板，於室溫下，置水平台上晾乾，在反射光及透射光下檢視，表面應均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，於110℃烘30分鐘，冷卻後立即使用或置乾燥箱中備用，或用商品預製板。
2.點樣
吸取上述三種溶液(對照品、供試品、陰性對照品)各4μL、10μL、10μL，分別點於同一矽膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大於2mm，點間距離可視斑點擴散情況，以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
3.展開
將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以石油醚－醋酸乙酯－甲醇－濃氨水(10:10:2:1)為展開劑，飽和30min，上行展開l0cm，取出，晾乾，完全揮去溶媒後，噴以碘化鉍鉀試液顯色，晾乾。供試品與對照品在薄層色譜相應的位置上，顯相同的黃色斑點；陰性對照品與對照品在薄層色譜相應的位置上不出現斑點。
4. 標準曲線的製備
分別吸取對照品溶液2，4，5，6，8μL分別點於同一薄層板上，按上述薄層層析條件，展開、顯色、掃描，以貝母素乙點樣量對斑點面積積分值繪製標準曲線,進行直線回歸，得到回歸方程。
5.含量測定
在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，採用吸收法，用雙波長進行掃描，波長：λS =516nm，λR=650nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。
用外標法測定時，若對照品各數據點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜採用二點法校正，必要時用多點法校正。
參考文獻： 徐瑋一,楊勤,王洪等.黃氏響聲丸的定量分析.
