培養要求
鉤端螺旋體雖屬原核細胞型微生物,但營養要求複雜,其培養基中常需加入10%新鮮、滅活的兔血清或牛血清。分離培養鉤端螺旋體最常用的培養基是兔血清的柯索夫培養基,該類培養基含有能促進鉤端螺旋體生長的長鏈脂肪酸、B族維生素、無機鹽等。
標本採集
標本採集依病程而定。
培養方法
1.標本接種:血液標本接種前無須特殊處理,尿液標本離心後取沉渣接種。
2.培養:每份標本接種2支或3支柯索夫液體培養基試管,每管接種全血0.1ml,或中段尿液沉渣0.3~0.5ml,放置在28℃培養箱內培養。
3.從培養的第3天起每天觀察培養基的情況,一般7到10天可取培養物做暗視野顯微鏡檢查並尋找鉤端螺旋體。
培養結果
鉤端螺旋體生長良好者,液體培養基一般呈現為半透明、雲霧狀渾濁,液面下1cm左右最明顯。培養7到10天在暗視野顯微鏡下觀察,確定有無鉤端螺旋體。若培養1個月仍無鉤端螺旋體生長則為陰性。
臨床意義
鉤端螺旋體的分離培養對研究鉤端螺旋體的生物學特性、診斷鉤端螺旋體病、研製鉤端螺旋體疫苗及進行鉤體病的流行病學調查等均具有重要意義。