簡介
anther culture 用植物組織培養技術,把發育到一定階段的花葯,通過無菌操作技術,接種在人工培養基上,以改變花葯內花粉粒的發育程式,誘導其分化,並連續進行有絲分裂,形成細胞團,進而形成一團無分化的薄壁組織——愈傷組織,或分化成胚狀體,隨後使愈傷組織分化成完整的植株。詳情
用於花葯或花粉培養的供體植株,在生長條件下,從幼年的植株取出花葯。由於花粉發育時期和花蕾的某些外部形態特徵(如花冠筒長度和花冠露出花萼的時間等)之間的大致的相關性,因此可以利用這些外部標誌,去選擇大致處於所需要時期的花蕾。但在實驗中必須由每個花蕾取出一個花葯,通過鏡檢確定花粉發育的準確時期。
在水稻中,以單核靠邊期的花粉對誘導單倍體植株較為適宜,在外部形態上可根據葉枕距為5~15cm,穎片淡黃綠色、雄蕊長度接近穎片長度的1/2這些條件鑑定。在取穗前先將旗葉鞘用70%酒精擦洗一遍。在超淨工作檯內剝去旗內鞘,取出稻穗,放入10%漂白粉溶液中消毒10min,換無菌水洗一次。在取花葯之前用70%酒精將手擦洗兩遍。取花葯時左手持穗,右手用鑷子從穎殼中取出花葯,放在無菌培養皿中,待花葯有一定數目時,用接種環將他們接種到培養基上。培養5天后,花葯逐漸變為黑褐色,20天左右花葯裂開,從中長出淡黃色的花粉愈傷組織,以後先形成芽,後長出根,形成幼苗。
菸草花葯培養的最適取樣期是花粉為單核期的花蕾,此時花蕾的花冠大約與萼片等長。蘆筍花葯培養的最適取樣期也是單核期的花粉,花蕾長2~2.5mm,選取一級側枝的花蕾較為合適,因為在一級側枝的花蕾發育良好,數量大,發育同步。菸草花葯消毒方法基本與水稻花葯培養相同。
必須注意整個操作過程中不應使花葯受到損傷,若受到損傷,則應淘汰,因為損傷常常會刺激花粉壁形成二倍體的愈傷組織。