檢查前準備
腦脊液標本的獲取需要進行腰椎穿刺,必要時可從小腦延髓池或側腦室進行穿刺採集,因此應向患者或其授權委託人進行檢驗必要性的說明,同時向其詳細闡明穿刺的部位、方法、可能的併發症等,取得其理解和同意後方可進行。腦脊液標本應儘快送檢,不能及時送檢的應妥善保存。
檢查內容
1.一般檢查
觀察腦脊液透明度、顏色、凝固性,測定其比重及pH。比重測定可用折射儀法進行測定,微量pH值計測量pH。
2.分子成分檢查
(1)蛋白質:可用Pandy試驗進行蛋白質定性檢測,磺基水楊酸-硫酸鈉比濁法、雙縮脲法、染料結合法進行蛋白質定量檢測。
(2)葡萄糖:可用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法進行檢測,結果因穿刺部位不同而不同。
(3)氯化物:可用硝酸汞滴定法、硫氰酸汞比色法、離子選擇電極法、電量分析法等進行檢測。
(4)酶及其他成分:常用酶速率法進行酶的檢測,常見的檢測指標有天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、乳酸脫氫酶(LD)、肌酸激酶(CK)、腺苷脫氨酶(ADA)等。其他成分包括谷氨醯胺、乳酸及溶菌酶的測定,其中谷氨醯胺可用硫酸加熱水解法進行定量檢測。
(5)蛋白質電泳:常用乙酸纖維薄膜電泳法、瓊脂糖凝膠電泳法進行檢測。由於其蛋白質量較少,檢查前需經過高分子聚乙二醇或右旋糖酐透析液濃縮方可檢測。
(6)免疫球蛋白:檢測方法主要有免疫電泳法、免疫散射比濁法和免疫擴散法。利用抗原和抗體在凝膠或特殊緩衝液中進行特異性結合,形成抗原抗體複合物,再通過測定凝膠中抗原抗體複合物沉澱環直徑或特殊緩衝液中抗原抗體複合物濁度,計算出免疫球蛋白含量。
(7)髓鞘鹼性蛋白測定:可用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法或放射免疫法進行檢測。
3.細胞學檢查
(1)細胞總數計數:可用體液細胞分析儀進行分析,或使用顯微鏡計數法進行分析。顯微鏡計數法是將腦脊液標本充入血細胞計數板內,低倍鏡下計數2個計數室四角和中央大方格共10個方格內的細胞數,細胞過多、渾濁或血性腦脊液可稀釋後計數,再換算為細胞總數。
(2)白細胞計數:可用體液細胞分析儀進行分析,或用顯微鏡計數法進行分析。非血性標本用冰乙酸浸洗過的吸管吸取腦脊液標本,充入血細胞計數板內計數。白細胞過多時可先進行稀釋再計數,最後進行換算。
(3)白細胞分類計數:可用體液細胞分析儀進行分類計數,也可使用顯微鏡分類法或染色分類法進行分類計數。顯微鏡分類法是在高倍鏡下對100個有核細胞進行分類計數,如數量不足則直接記錄具體數字。染色分類法則是將標本進行離心,取沉澱物進行塗片,乾燥後行Wright染色,再進行分類計數。
4.病原學檢查
(1)細菌:可用顯微鏡檢查、細菌培養和ELISA法進行檢測。顯微鏡檢查可用直接塗片法或塗片染色法進行檢查。細菌培養應選擇適當的培養基和培養環境,並可在培養後進行藥敏試驗。
(2)寄生蟲:顯微鏡檢查可發現血吸蟲卵、肺吸蟲卵、弓形蟲、阿米巴滋養體等,腦囊蟲病患者可進行腦囊蟲補體結合試驗,神經梅毒診斷首選螺旋體螢光抗體吸收試驗。
正常參考值
1.一般檢查
正常的腦脊液為清澈透明的無色或淡黃色水樣液體,放置24小時不形成薄膜,無凝塊或沉澱,腰椎穿刺腦脊液比重1.006~1.008,腦室穿刺腦脊液比重1.002~1.004,小腦延髓池穿刺比重1.004~1.008。
2.化學成分檢查
(1)蛋白質:定性檢查為陰性或弱陽性,定量檢查腰椎穿刺腦脊液為0.2~0.4g/L、小腦延髓池穿刺腦脊液為0.1~0.25g/L、腦室穿刺腦脊液為0.05~0.15g/L。
(2)葡萄糖:腰椎穿刺腦脊液為2.5~4.4mmol/L,小腦延髓池穿刺為2.8~4.2mmol/L,腦室穿刺為3.0~4.4mmol/L。
(3)氯化物:成人:120~132mmol/L; 兒童:111~123mmol/L; 嬰兒:110~122mmol/L。
(4)酶及其他成分:AST:<20U/L,ALT:<15U/L,LD:<40U/L,CK:0.5~2U/L,ADA:0~8U/L,谷氨醯胺用硫酸加熱水解法測定值為0.41~1.10mmol/L,乳酸:1.0~2.9mmol/L,溶菌酶無或含量甚微。轉氨酶(ALT、AST):約為血清酶活性的1/2;乳酸脫氫酶(LDH);約為血清酶活性的1/10;磷酸肌酸激酶(CPK):低於血清酶活性。
(5)蛋白質電泳:前白蛋白:0.03~0.07,白蛋白:0.51~0.63,α1球蛋白:0.06~0.08,α2球蛋白:0.06~0.10,β球蛋白0.14~0.19,γ球蛋白0.06~0.10。
(6)免疫球蛋白:IgG:10~40mg/L,IgA:0~6mg/L,IgM:0~013mg/L,IgE含量極低。
(7)髓鞘鹼性蛋白測定:含量<4μg/L。
3.細胞學檢查
正常人腦脊液無紅細胞,白細胞因年齡不同而異,成人:(0~8)×106/L,嬰幼兒(0~15)×106/L,新生兒(0~30)×106/L。細胞分類多為淋巴細胞及大單核細胞,二者比例約為7:3,有時可見內皮細胞,無中性粒細胞。
4.病原學檢查
正常人腦脊液無細菌、寄生蟲或寄生蟲卵檢出。
臨床意義
腦脊液檢查結果對疾病診斷尤其是中樞神經系統疾病的診斷有重要意義。其對細菌性腦膜炎、結核性腦膜炎和真菌性腦膜炎檢查有高靈敏度和高度特異性,對病毒性腦膜炎、蛛網膜下腔出血、多發性硬化症、神經梅毒、椎旁膿腫等檢查有靈敏度和中等特異性,對腦膜惡性腫瘤檢查有中等靈敏度和高特異性,對顱內出血、病毒性腦炎、硬膜下血腫有中等靈敏度和中等特異性的提示作用。腦脊液中檢出病原體對具有直接診斷的意義,對腦脊液成分的檢測可為治療效果評估、預後判斷提供參考。