胸腹水脫落細胞學檢查

胸腹水中滴加溶血劑法檢查脫落細胞,此法簡單,快速,經濟,無需特殊設備,又能提高癌細胞的陽性檢出率,特別適用於各基層醫院,值得推廣 。

製作方法

為了提高癌細胞的檢出率,必須製備良好的塗片,即塗片上應該是癌細胞成份多,其它有形成份少,特別是紅細胞成份少,使塗片透光度好,顯微視野背景清晰,分辯各種有核細胞形態結構容易,作出正確診斷。在胸腹水中滴加溶血劑,正是解決了這一矛盾。

操作規範及管理

1 標本管理

1.1提供標識抗凝管 由實驗室提供含EDTA—K2抗凝劑塑膠軟塞10ml標識試管。

1.2接收查對制度 嚴格執行標本查對制度。認真查對標識試管上的病人姓名、床號和聯號,查看送檢單檢查項目、送檢標本是否符合要求,並按序登記、編號,記錄接收時間。

1.3準備載玻片 推薦載玻片厚度為1-1.2mm,長寬25.4-76.2mm,一端有磨砂區。準備載玻片6張,分別在磨砂區寫上患者姓名和編號。

1.4離心和傾液規定 即刻離心,2500r/min離心5min。離心後試管的細胞沉渣端向里,一手持離心管緩慢棄去上清液,至80度左右保持30s,另一手持棉球吸去殘液,沉渣量應少於0.1ml。離心後紅細胞顯著過多時,應吸取白細胞層塗片。也可加入低滲氯化鉀溶液10ml破壞紅細胞,離心後沉澱物製片[1]。

1.5推片要求 將管底沉澱細胞搖散,使其沿管壁緩慢滴於載玻片上,製成5-6張塗片。也可用移液器吸取進行塗片。塗片與一般塗片製備不同,規定推制的塗片膜面宜厚但必須有良好的尾部,塗片長寬以(2-2.5)cm×(3.5-4)cm左右為宜。若管底殘留灰白色微細胞團(塊)須用小棒或移液器取之壓碎拉片或展片。

1.6塗片處理原則 取3-4張塗片Wright-Giemsa染色。1~2張作細胞免疫化學染色,按要求固定。

1.7未用和未染色塗片的處理 塗片乾燥後疊放,其最上一張塗片面必須朝下。

2 標本運送和保存

臨床醫師採集胸腹水標本並按要求盛於含EDTA—K2抗凝劑的塑膠軟塞10ml標識試管後,應於0.5-1h內送到實驗室。對於特殊情況不能及時送達者可將標本置於4℃冰櫃保存。

3 普通染色及其質量保證

3.1染色盒 染色需在染色盒中進行。染色盒常用病理濕盒,有多種規格,常用25cm-30cm,內有2排染色架,每排可放置8張塗片進行染色,端邊有一流水孔。

3.2 Wright染色液質量 Wright染色液自配時,因甲醇質量有批間差異,故每批染液使用前需作對照試驗。常見問題是染色偏酸,用氫氧化鈉溶液調節緩衝液pH,直至染色滿意,即基本達到ICSH推薦的染色效果[2]。

4 鏡檢和報告質量管理

4.1鏡檢前質量管理 對顯微鏡質量應予以高度重視。執行鏡檢前查對制度。了解臨床和相關實驗室資料,以便與鏡檢結果綜合分析。

4.2鏡檢質量管理 首先用低倍鏡巡視全片,對發現的異常細胞用油鏡予以確認,對應補充的本實驗室項目即時進行。

4.3診斷報告質量管理 執行檢驗和復檢二級鏡檢制度和二級報告審查。後者是檢查報告單有無內容遺漏和錯誤。診斷意見以證據為基礎,客觀、全面、慎重地評價所見異常的診斷價值。不管豎式和橫式報告單,規定一般報告配2幅細胞圖像,找到癌細胞等有診斷價值的細胞配多幅圖像,常用一大二小組合,其中1-2個小幅為細胞免疫化學染色。規定在收標本後48h內發出報告,急需時以口頭初步報告。診斷報告發出後,主動及時接受臨床的反饋信息,並加強交流和合作。

5 細胞免疫化學染色質量管理

細胞免疫化學每批染色對照都應有良好的結果。抗原陽性表達必須在細胞特定的抗原部位才能視為陽性。不論陽性表達的強弱、陽性細胞的多少,只要定位準確,著色清晰,應視為陽性表達。陰性結果不能視為抗原不表達,還要排除可能存在的假陰性。當細胞免疫化學染色判斷結果與形態學檢查不一致時,應以細胞形態學為主並結合臨床和其他實驗室資料加以綜合分析。

6 標本保存、室內讀片、會診和外借制度

6.1標本保存 所有染色標本全部存檔,至少保存5年,同時保存圖文報告和細胞圖像。

6.2實驗室讀片討論制度 每日除執行報告前的二級檢查和討論外,還實施報告發出後的讀片討論制度。

6.3會診和借片制度 會診和借片一般應予支持,但須辦理手續,同時要求借片單位有反饋的會診意見,以利於交流和借鑑。

7 建立區域性讀片制度,加強室間質量評價活動

建立健全的胸腹水脫落細胞學標本讀片制度,如有可能,開展附有臨床和一般實驗室資料的脫落細胞學塗片室間質量評價活動。通過這些活動,使從業人員提高形態學鑑識能力。

8 技術培訓和考核制度

脫落細胞學檢驗是臨床檢驗的薄弱部門,它既需臨床檢驗技術,又需要一定的病理學基礎知識。當前的臨床檢驗脫落細胞形態學水平已遠遠不能適應學科發展的需要。除了必須高度重視和加強對專業人才的培養外,建立脫落細胞學檢查技術培訓和考核制度也十分重要。

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