肽核酸[化學工業出版社圖書]

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基本信息

肽核酸

作者:何為、馬立人 主編

叢書名:

出版日期:2003年8月 書號:7-5025-4471-2

開本:32 裝幀:平膜 版次:1版1次 頁數:288頁

內容簡介

肽核酸(PNA)是一種以中性醯胺鍵為骨架併兼有多肽和核酸性質的獨特化合物,可以高度親和並序列特異地與DNA和RNA結合,而且形成的雜交複合物具有相當高的熱穩定性以及獨特的耐離子強度變化性質。PNA不能被蛋白酶和核酸酶所降解。本書是在收集了截止於2002年12月所發表的有關PNA的文獻以及internet上的一些相關資料,編寫而成的。詳細地闡述了有關PNA的化學、PNA的雜交性質、作為分子生物學工具的套用、作為反義的和抗基因製劑的潛在套用、在診斷領域的套用以及在生物晶片和生物感測器中的套用。

目錄

1概述1

11基本概念1

12PNA的化學2

13PNA的物理化學性質3

14PNA作為分子生物學工具6

141增強的PCR擴增6

142PNA的預凝膠雜交7

143PNA輔助的稀有切割8

144人工限制性酶系統8

145測定端粒的大小8

146核酸的純化9

15PNA作為診斷的工具9

16PNA在基因靶向藥物研究中的套用10

161反義套用10

162抗基因性質10

163PNA的細胞內導入11

164抗微生物PNA12

165PNA在癌症基因治療中的套用12

166抗病毒PNA12

17研製PNA的公司及其產品13

參考文獻13

2PNA的化學22

21用BOC化學合成PNA寡聚物22

211PNA合成23

212合成方案28

213討論35

參考文獻37

22用FMOC化學合成PNA寡聚物39

221PNA合成41

222小結50

參考文獻51

23PNA/DNA嵌合體51

231合成策略和單體PNA構成單元53

232Mmt/乙醯基保護的單體構成單元的合成循環54

233PNA和DNA之間連線劑的選擇58

234實驗方案59

235舉例61

236討論66

參考文獻69

24用MMT化學合成PNADNA嵌合體71

241討論73

242材料75

243方法76

244結論79

參考文獻80

25PNA的標記81

251實驗方案82

252舉例83

253小結86

參考文獻87

26手性PNA的合成89

261手性肽核酸單體的合成89

262以N氨乙基D脯氨酸為骨架的手性肽核酸的合成90

263用Fmoc工藝合成手性PNA(l或 dAla)單體及寡聚物91

參考文獻99

3PNA的雜交性質和分析、檢測100

31PNANA作用的熱力學100

311樣品製備的概況101

312吸收熔解曲線102

313等溫滴定量熱法106

314結論108

參考文獻109

32PNA的性質110

321雜交親和性110

322雜交條件111

323特異性識別能力111

33PNA雙鏈DNA鏈頂替複合物及其鑑定技術111

331鏈頂替複合物的形成111

332PNA雙鏈DNA鏈頂替複合物的鑑定技術113

333結語和前瞻127

參考文獻127

34PNA與DNA修飾酶的相互作用129

341PNA對端粒酶活性的抑制129

342PNA檢測解旋酶活性134

參考文獻139

35基質輔助解吸飛行時間質譜檢測PNA雜交物用於基因分析140

351實驗方案142

352實驗結果145

353討論147

參考文獻151

4PNA在分子生物學研究中的套用154

41PNA導向的基因組DNA特異切割154

411操作程式156

412實例157

413討論159

參考文獻162

42雙鏈DNA的捕獲165

421操作規程166

422實例168

423討論169

參考文獻172

43PNA親和標記探針雜交、純化核酸174

431操作規程176

432實例178

433套用和局限性179

參考文獻180

44運用PNA進行質粒的標記182

441操作規程183

442實例結果187

443討論190

參考文獻191

45PNA封閉探針——增強探針分析的特異性191

451材料和方法192

452結果與討論196

453結論203

參考文獻203

46PCR鎖止技術(PCR Clamping)204

461PCR鎖止技術簡介204

462操作規程206

463實例207

464展望211

參考文獻211

47PNA預凝膠雜交212

參考文獻214

5肽核酸在藥物開發中的潛在套用215

51藥物開發中的PNA技術216

511PNA的細胞內導入216

512PNA的反義作用218

513PNA的抗基因作用219

514PNA作為調節基因表達的工具223

參考文獻224

52PNA作為抗菌劑227

參考文獻232

53PNA在癌症基因治療中的套用232

參考文獻234

54PNA作為抗病毒藥物235

參考文獻236

55PNA藥物的前景236

參考文獻238

6PNA在診斷領域的套用239

61PNA技術239

611PNA探針239

612自身報告的PNA探針和QPNA PCR240

613PNA探針的設計243

參考文獻245

62PNA探針的套用247

621PNA探針在組織化學的原位雜交中的套用247

622PNA螢光原位雜交(FISH)在細胞遺傳學分析中的套用252

623PNA探針在微生物分析中的套用254

參考文獻262

63PNA在流式細胞儀中套用265

參考文獻267

64PNA探針套用前景展望267

參考文獻268

7PNA在生物晶片和生物感測器中的套用270

71PNA陣列用於核酸檢測271

711實驗方案271

712結果277

713討論279

參考文獻280

72PNA生物感測器用於核酸檢測281

721實驗方案282

722舉例284

723討論和展望288

參考文獻290

附錄291

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