基本信息
肽核酸
作者:何為、馬立人 主編
叢書名:
出版日期:2003年8月 書號:7-5025-4471-2
開本:32 裝幀:平膜 版次:1版1次 頁數:288頁
內容簡介
肽核酸(PNA)是一種以中性醯胺鍵為骨架併兼有多肽和核酸性質的獨特化合物,可以高度親和並序列特異地與DNA和RNA結合,而且形成的雜交複合物具有相當高的熱穩定性以及獨特的耐離子強度變化性質。PNA不能被蛋白酶和核酸酶所降解。本書是在收集了截止於2002年12月所發表的有關PNA的文獻以及internet上的一些相關資料,編寫而成的。詳細地闡述了有關PNA的化學、PNA的雜交性質、作為分子生物學工具的套用、作為反義的和抗基因製劑的潛在套用、在診斷領域的套用以及在生物晶片和生物感測器中的套用。
目錄
1概述1
11基本概念1
12PNA的化學2
13PNA的物理化學性質3
14PNA作為分子生物學工具6
141增強的PCR擴增6
142PNA的預凝膠雜交7
143PNA輔助的稀有切割8
144人工限制性酶系統8
145測定端粒的大小8
146核酸的純化9
15PNA作為診斷的工具9
16PNA在基因靶向藥物研究中的套用10
161反義套用10
162抗基因性質10
163PNA的細胞內導入11
164抗微生物PNA12
165PNA在癌症基因治療中的套用12
166抗病毒PNA12
17研製PNA的公司及其產品13
參考文獻13
2PNA的化學22
21用BOC化學合成PNA寡聚物22
211PNA合成23
212合成方案28
213討論35
參考文獻37
22用FMOC化學合成PNA寡聚物39
221PNA合成41
222小結50
參考文獻51
23PNA/DNA嵌合體51
231合成策略和單體PNA構成單元53
232Mmt/乙醯基保護的單體構成單元的合成循環54
233PNA和DNA之間連線劑的選擇58
234實驗方案59
235舉例61
236討論66
參考文獻69
24用MMT化學合成PNADNA嵌合體71
241討論73
242材料75
243方法76
244結論79
參考文獻80
25PNA的標記81
251實驗方案82
252舉例83
253小結86
參考文獻87
26手性PNA的合成89
261手性肽核酸單體的合成89
262以N氨乙基D脯氨酸為骨架的手性肽核酸的合成90
263用Fmoc工藝合成手性PNA(l或 dAla)單體及寡聚物91
參考文獻99
3PNA的雜交性質和分析、檢測100
31PNANA作用的熱力學100
311樣品製備的概況101
312吸收熔解曲線102
313等溫滴定量熱法106
314結論108
參考文獻109
32PNA的性質110
321雜交親和性110
322雜交條件111
323特異性識別能力111
33PNA雙鏈DNA鏈頂替複合物及其鑑定技術111
331鏈頂替複合物的形成111
332PNA雙鏈DNA鏈頂替複合物的鑑定技術113
333結語和前瞻127
參考文獻127
34PNA與DNA修飾酶的相互作用129
341PNA對端粒酶活性的抑制129
342PNA檢測解旋酶活性134
參考文獻139
35基質輔助解吸飛行時間質譜檢測PNA雜交物用於基因分析140
351實驗方案142
352實驗結果145
353討論147
參考文獻151
4PNA在分子生物學研究中的套用154
41PNA導向的基因組DNA特異切割154
411操作程式156
412實例157
413討論159
參考文獻162
42雙鏈DNA的捕獲165
421操作規程166
422實例168
423討論169
參考文獻172
43PNA親和標記探針雜交、純化核酸174
431操作規程176
432實例178
433套用和局限性179
參考文獻180
44運用PNA進行質粒的標記182
441操作規程183
442實例結果187
443討論190
參考文獻191
45PNA封閉探針——增強探針分析的特異性191
451材料和方法192
452結果與討論196
453結論203
參考文獻203
46PCR鎖止技術(PCR Clamping)204
461PCR鎖止技術簡介204
462操作規程206
463實例207
464展望211
參考文獻211
47PNA預凝膠雜交212
參考文獻214
5肽核酸在藥物開發中的潛在套用215
51藥物開發中的PNA技術216
511PNA的細胞內導入216
512PNA的反義作用218
513PNA的抗基因作用219
514PNA作為調節基因表達的工具223
參考文獻224
52PNA作為抗菌劑227
參考文獻232
53PNA在癌症基因治療中的套用232
參考文獻234
54PNA作為抗病毒藥物235
參考文獻236
55PNA藥物的前景236
參考文獻238
6PNA在診斷領域的套用239
61PNA技術239
611PNA探針239
612自身報告的PNA探針和QPNA PCR240
613PNA探針的設計243
參考文獻245
62PNA探針的套用247
621PNA探針在組織化學的原位雜交中的套用247
622PNA螢光原位雜交(FISH)在細胞遺傳學分析中的套用252
623PNA探針在微生物分析中的套用254
參考文獻262
63PNA在流式細胞儀中套用265
參考文獻267
64PNA探針套用前景展望267
參考文獻268
7PNA在生物晶片和生物感測器中的套用270
71PNA陣列用於核酸檢測271
711實驗方案271
712結果277
713討論279
參考文獻280
72PNA生物感測器用於核酸檢測281
721實驗方案282
722舉例284
723討論和展望288
參考文獻290
附錄291