等溫滾環擴增技術

等溫滾環擴增技術又稱鏈替代擴增 方法，既可用於信號的放大也 可用於目的基因的擴增。基於鏈替代擴增方 法建立的多重替代擴增（MDA)可用於擴增全基因組。該方法利用 DNA聚合酶和隨機六聚體引物在常溫等溫下擴增，避免了高溫下DNA降解對擴增產物質量的影 響；由於DNA聚合酶具有非常高的向 前延伸的活性，模板的結合緊密，使得 在存在複雜的一級和二級結構情況下的擴增 反應仍能順利進行。

與DOP-PCR和PEP- PCR比較，MDA無論是擴增的效率，還是擴增的可信度都明顯優於DOP-PCR和PEP-PCR，能均勻擴增全基因組，而沒有明顯的偏移。MDA可以從1〜10個拷貝的基因組DNA擴增出20〜30fig的產物，DNA產物的平均長度大於10kb。（侯一平）