方式簡介
氣相色譜分析中,色譜柱的溫度控制方式分為恆溫和程式升溫兩種。
基本理論
保留溫度
在程式升溫中,組分極大點濃度流出色譜柱時的柱溫叫保留溫度,其重要性相當於恆溫中的tR,VR。對每一個組分在一定的固定液體系中,TR是一個特徵數據,即定性數據,不受加熱速度、載氣流速、柱長和起始溫度影響。
1、保留溫度及其它保留值
線性升溫時 TR = T0 + rtr
tr = ( TR – T0 ) / r 程式升溫中某組分的保留時間
VP = tr F 保留體積
程式升溫中某組分的保留溫度,相當於恆溫色譜中保留值的對數,因此,在恆溫色譜中保留值的對數遵守的規律,在程式升溫中也成立。
(1)保留溫度與碳數關係
TR = aN + b
TR = cTb + d
(2)保留溫度與沸點關係
初期凍結
在程式升溫色譜分析中,當一多組分寬沸程混合物進樣後,由於起始溫度很低,因此,對少數低沸點組分為最佳柱溫,得到良好的分離。對於大多數組分,這個起始溫度是太低了,因為k’值很大,蒸氣壓很低,大都溶解在固定液里,所以,這些組分的蒸氣帶(色譜帶)的移動速度非常慢,幾乎停在柱入口不動,這種現象是程式升溫色譜中所特有的,叫初期凍結。
隨著柱溫的升高,某些組分的蒸氣帶便開始以可觀的速度移動,柱溫越接近保留溫度,即越接近出口處,色譜帶速度增加的越快。
一般來說,從(TR–30oC)——TR色譜帶通過柱的後半段,
TR-300C時,恰好位於柱子的中央。
TR-300C 1/2L
TR-600C 1/4L
TR-900C 1/8L
有效柱溫
T’= 0.92TR 也有 T’ = TR – 450C
注意事項
有效柱溫是獲得一定理論板數和分離度的特徵溫度,對兩個相鄰難分離組分,它是實現分離的最佳恆溫溫度,在此恆溫溫度下,兩組分的分離可達到與程式升溫同樣的柱效和分離度。
主要優點
程式升溫具有改進分離、使峰變窄、檢測限下降及省時等優點。
因此,對於沸點範圍很寬的混合物,往往採用程式升溫法進行分析。
在氣相色譜中多採用程式升溫技術解決洗脫色譜的一般問題,而在液相色譜中多採用梯度洗脫技術解決這一問題。
色譜升溫實驗
我用毛細管氣相色譜做一階程式升溫,色譜柱加溫到初始溫度,準備燈亮後,按下起始鍵,出現" NOT REDAY 3".但是過幾分鐘再按起始鍵才開始正常程式升溫,這是什麼問題?
做程式升溫時,溫度沒達到設定的終止溫度,而色譜峰已經出完,這時候可以按下停止鍵停止加溫嗎?這對實驗和儀器有沒有影響?需不需要把程式升溫執行完才能進行下一次實驗操作. 溫度到達設定溫度,ready燈就亮?你可以看看trouble shooting中not ready 3是什麼意思。一般來說,溫度到達設定值後,要在若干分鐘內保持穩定,ready燈才亮。才能夠開始分析。這個時間在工作站中可以設定。或者帶有prerun的色譜儀,你沒有按prerun準備色譜條件?
溫度沒有到達終止溫度,確認色譜峰已經出完,通常可以停止分析。但是不推薦這樣做,因為這樣做存在很大的風險。如果著急看結果,可以在工作站中進行SnapShot快照功能去看結果。或者用處理機的Stop.TM來控制數據處理機開始計算。早停下來的風險主要在兩個方面:1、色譜儀內置閥切換等時間程式,停止後所有程式停止,可能有一些閥門等沒有完成動作並復位。導致下一次分析不正常。2、溫度程式的設定都是有一定保護性的,通常程式升溫尾段設定一個快速升溫並保持來驅除樣品中的重組份雜質。如果你早停止,可能在樣品不合格的時候損失雜質峰,並導致色譜柱內重組份雜質存留,影響下一次分析。問題1.柱溫已經穩定,但是色譜儀其他的地方還有不穩定的,如汽化溫度、檢測器溫度,有些儀器的程式中還設有初溫達到設定值的穩定時間不夠等。
問題2.若確信試樣組分已經出完,可以提前終止分析動作。提前終止分析,一般來說,對儀器和試驗結果沒有影響,但是對於一些高檔儀器(自動化純度高),由於一些程式沒有完全執行完,會對下一次進樣的穩定時間有影響——造成儀器穩定時間增長。
若確信組分已經出完,又想縮短分析時間,你可以把程式升溫的參數設定修改一下:把終溫的穩定時間變短,或者把終溫設定低一些。