白僵菌分類
常見白僵菌共有三種:球孢白僵菌、小球孢白僵菌、布氏白僵菌。依據形態指標、生理生化指標及核酸指標將白僵菌屬分為7個種,分別是球孢白僵菌、布氏白僵菌、白色白僵菌、多形白僵菌、蠕孢白僵菌、粘孢白僵菌和蘇格蘭白僵菌。球孢、小球孢、布氏三種白僵病菌,其不同發育階段,雖具有共同的形態特徵,但也存在一定的差異。其區別是:球孢和小球孢白僵菌,分生孢子雖都為球形或卵形(約各50%),均生於對稱成直角的茸狀產孢細胞頂端,分生孢子梗呈直角分支聚成集團。所不同的是前者孢子大,一般2.5—3.0微米,菌落呈平絨狀,在明膠培養基本逐漸從白色變到乳白色,而在馬鈴薯瓊脂培養培養的底部無色或淡黃色。後者孢子較小,一般為2-2.5微米,菌落白色至乳白色初為疏茸狀或棉絮狀,後期形成乳粉狀的孢子層,不使馬鈴薯瓊脂培養基斜面變色,但在清淅明交培養基上呈粉紅色,顏色很不顯著,而且10天后便消失。布氏白僵菌不同於前兩種的主要特徵,是其分生孢子大多是亞園形或橢圓形,而且分生孢子開差較大,一般為2.0-6.0×1.5-4微米,生於產孢細胞頂端新延伸的“乙”形絲形器上,菌落表面高低不同,白色,初為茸毛狀或棉絮狀,後期形成粉狀,在明膠培養基的底部呈深紅色至桑色,某些菌絲命名馬鈴薯培養基呈不同程度淺紫色至紅色。
球孢白僵菌菌落呈絨狀、叢捲毛至粉狀,有時呈繩索狀,但很少形成孢梗索。菌落培養初期多呈白色,後來變成淡黃色,偶成淡紅色;背面無色或淡黃色至粉紅色。
如今在農業部登記的白僵菌有球孢蟲白僵菌(主要用於防治松毛蟲和玉米螟)和布氏白僵菌(主要用於防治花生蠐螬)兩種,登記劑型有粉劑、可濕性粉劑或油懸浮劑。
球孢白僵菌(Beauveria bassiana)為子囊菌類的真菌,可工業化培養生產,利用其產生的分子孢子加工成微生物殺蟲劑。原藥外觀為乳白色只至淡黃色粉末。分生孢子主要通過表皮降解酶作用,笌管穿透昆蟲體壁,在昆蟲體內增殖,吸收昆蟲體內營養和水分,進而致死目標害蟲。
所謂白僵蟲就是白僵菌的分生孢子落在昆蟲體上,在合適溫濕條件下,即可發芽直接侵入昆蟲體內,以昆蟲體內的血細胞及其他組織細胞作為營養,大量增殖,以後菌絲穿出體表,產生白粉狀分生孢子,從而使害蟲呈白色僵死狀,稱為白僵蟲。白僵菌製劑對人、畜無毒,對作物安全,無殘留、無污染,但能感染家蠶幼蟲,形成僵蠶病。
活性成分
白僵菌分生孢子在寄主表皮或氣孔、消化道上,遇適宜條件開始萌發,出生芽管。同時產生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質酶溶解昆蟲的表皮,由芽管入侵蟲體,在蟲體內生長繁殖,消耗寄主體內養分,形成大量菌絲和孢子,布滿蟲體全身。同時產生各種毒素,如白僵菌素(Beauvericin),纖細素(Tenellin)和卵孢素(Oosporein)等。白僵菌素為含N-甲基胺基酸的環狀肽。白僵菌素為針狀無色晶體,加醋酸鉛於水溶液中可產生絮狀白色沉澱,對茚三酮顯正反應。
產品宣傳
白僵菌能夠在自然條件通過體壁接觸感染殺死害蟲.白僵菌可寄生15個目149個科的700餘種昆蟲,對人畜和環境比較安全、害蟲一般不易產生抗藥性、可與某些化學農藥(殺蟲劑、殺蟎劑、殺菌劑)同時使用.1995年美國環保暑(EPA)允許Mycotech公司生產的球孢白僵菌製劑MycotrolRWP,用於防治蚜蟲和粉虱,至今為止,白僵菌在國際上已有17種產品註冊登記,用於防治蠐螬、家蠅、介殼蟲、白粉虱、蚜蟲、薊馬、馬鈴薯葉甲、蜚蠊、蝗蟲、蚱蜢、蟋蟀、棉鈴象、棉跳盲蝽、玉米螟、天牛、甘蔗金龜子等害蟲。白僵菌高孢粉是國家林業局推廣的高效生物殺蟲劑之一,可廣泛套用於森林害蟲,蔬菜害蟲,旱地農作物害蟲等。多年來,國內套用白僵菌對近40種農林害蟲防治成功,如今在生產中使用的主要有:松毛蟲、玉米螟、蠐螬、蝗蟲、馬鈴薯甲蟲、松褐天牛、白蟻、茶小綠葉蟬、桃小食心蟲等。白僵菌防治最成功的是苗圃、草坪、農田等的蠐螬,蠐螬危害花生、大豆、草坪、蔬菜、苗圃等多種作物。現在在有機農產品、茶葉生產中廣泛套用。
白僵菌高孢粉無毒無味,無環境污染,對害蟲具有持續感染力,害蟲一經感染可連續浸染傳播。一、無農殘。在農產品頻頻因農藥殘留超標被拒之門外的今天,即使施用白僵菌後立刻收穫產品也不會造成任何農藥殘留!
二、無抗性。害蟲對化學農藥的抗性使得其殺蟲效果逐年減退。 白僵菌通過在自然條件下與害蟲的體壁接觸感染致死,害蟲不會對其產生任何抗性。連年使用,效果反而越來越高。
三、再生長性。白僵菌新型生物農藥含有活體真菌及孢子。施入田間後,藉助適宜的溫度、濕度,可以繼續繁殖生長,增強殺蟲效果。
四、高選擇性。不同於化學農藥不分敵我的將益蟲、害蟲盡數毒殺,白僵菌專一性強,對非靶標生物如瓢蟲、草蛉和食蚜虻等益蟲影響較小。從而整體田間防治效果更好。
市場前景
在中國,白僵菌防治最成功的是森林、苗圃、草坪、農田等的蠐螬、玉米螟、松毛蟲、茶小綠葉蟬等。僅蠐螬、玉米螟、茶小綠葉蟬三種就已構成了巨大的潛在市場。
蠐螬危害花生、大豆、草坪、蔬菜、苗圃等多種作物,危害面積達數億畝,僅以花生為例,我國種植300萬公頃花生,均受蠐螬危害,按20%面積用白僵菌防治計算,需防治60萬公頃,需白僵菌製劑9000噸,合高孢粉400噸左右。
玉米螟是危害玉米的主要害蟲,僅東北地區發生面積即達800萬公頃,引起產量損失10%左右,如20%發生面積用白僵菌防治,計需白僵菌製劑1600噸。
茶小綠葉蟬是茶園上的常發害蟲,常年防治面積在250萬公頃左右,按10%面積25萬公頃計算,需白僵菌高孢粉50噸。近年來白僵菌防治松毛蟲面積每年在60萬公頃,需白僵菌高孢粉90噸。國內市場白僵菌高孢粉年需求在2000噸左右。
藥劑特性
白僵菌菌落為白色粉狀物,產品為白色或灰白色粉狀物。菌體遇到較高的溫度自然死亡而失效。其殺蟲有效物質是白僵菌的活孢子。孢子接觸害蟲後,在適宜的溫度條件下萌發,生長菌絲侵入蟲體內,產生大量菌絲和分泌物,使害蟲生病,約經4-5天后死亡。死亡的蟲體白色僵硬,體表長滿菌絲及白色粉狀孢子。孢子可借風、昆蟲等繼續擴散,侵染其他害蟲。
白僵菌需要有適宜的溫濕度(24~28℃,相對濕度90%左右,土壤含水量5%以上)才能使害蟲致病。害蟲感染白僵菌死亡的速度緩慢,經4~6天后才死亡。白僵菌與低劑量化學農藥(25%對硫磷微膠囊、48%樂斯本等)混用有明顯的增效作用。
作用機理
主要通過昆蟲表皮接觸感染,其次也可經消化道和呼吸道感染。侵染的途徑因昆蟲的種類、蟲態、環境條件等的不同而異。
掃描電鏡或螢光染色觀察發現,球孢白僵菌高毒菌株在棉鈴蟲幼蟲體壁上短暫生長即形成入侵結構,而低毒菌株在幼蟲體壁上產生細長的匍匐菌絲,這些菌絲會從害蟲體內吸收營養,最終導致害蟲死亡。
在浸染黑尾葉蟬時有兩種方式,第一是通過皮膚侵染。萌發的分生孢子在蟲體體壁幾丁質較薄的節間膜處長出芽管,芽管頂端分泌出溶幾丁質酶使幾丁質溶解成一個小孔,萌
發管進入蟲體。這時大概感染24小時。萌發的芽管借酶的作用,不斷溶解體壁幾丁質向前伸長,直至體壁上皮細胞才生成的菌絲也進入體壁,然後侵入血淋巴組織,菌絲起初延著細胞膜發育生長,再穿過細胞膜進入細胞內,於是原生質和細胞核失活,養料被耗盡,大量解體消失。大量皮下細胞層的破壞是由於體腔內菌絲侵染的結果,此時菌絲受到昆蟲、體內的血細胞的包圍,血細胞出現空泡,著色力降低。同時菌絲產生許多芽生孢子。芽生孢子萌發後,產生新的菌絲,以此反覆不斷增殖,衝破血細胞屏障進入體腔。在體腔內又以芽生孢子、分生孢子等方式繁殖,擴散到蟲體所有組織.如消化道、馬氏管、脂肪體等,這時約侵染48~72小時。感染96小時後,昆蟲組織器官大部分被破壞,菌絲成束穿出體表,形成氣生菌絲,並開始形成分生孢子梗和分生孢子。侵染120~118小時,蟲體表長出大量氣生菌絲,分生孢子梗和分生孢子並釋放出來,此時除部分體壁處,其他組織皆被破壞,養料亦被耗盡。
真菌孢子萌發,其芽管進入蟲體後在血腔內自由浮動,逐漸增長變為菌絲,這些菌絲通過吸收蟲體內的水分和養分,不斷伸長、分枝、增殖,併入侵器官部位,使整個蟲體充滿菌絲體。在該過程中,菌體會產生草酸鈣結晶,降低血淋巴的酸度,使機體代謝發生紊亂。
在適宜條件下,已被致死宿主體內的菌絲體產生分生孢子,蟲體表層破碎,孢子隨風釋放感染其他蟲體,形成循環侵染。
毒性 :
用50億/g活孢子製劑大白鼠腹腔注射和灌胃LD50分別為0.6±0.1g/kg及10.0g/kg,而用純孢子腹腔注射大白鼠LD50為128士12mg/kg,為低毒類微生物農藥,對人、畜無致病作用,屬弱的變態反應源,無“三致”問題。該製劑對人畜無毒,對果樹安全,但對蠶有害。
質量標準
高孢粉1000億/克,粉劑為平均活孢子80億/g,幅度50~120億/g,孢子萌發率90%以上,水分5%以下。顆粒劑,含活孢子50億/g。油懸浮劑100億/ml。
主要劑型
可濕性粉劑、粉劑、油懸浮劑、顆粒劑。
防治對象
可防治蠐螬、蝗蟲、馬鈴薯甲蟲、蚜蟲、葉蟬、飛虱、多種鱗翅目幼蟲如玉米螟/松毛蟲/桃小食心蟲/二化螟等。
使用方法
(噴菌法、噴粉法、活蟲傳病法、撒原菌粉)
1、防治森林害蟲,目前在生產防治上,主要採取地面或飛機噴灑白僵菌製劑的方式進行施藥。也可在雨季從林間採集森林葉部害蟲活幼蟲集中撒上白僵菌原菌粉,或配成含量為5億孢子/ml的菌液,采活蟲在菌液中沾一下再放回樹上任其自由爬行。這些帶菌蟲死後,長出很多分生孢子,即形成許多白僵菌流行點,逐步促成林間害蟲白僵病流行。
2、菌粉用水溶液稀釋配成菌液,每毫升菌液含孢子1億以上。用菌液在蔬菜上噴霧。
3、苗粉與2.5%敵百蟲粉均勻混合,每克混合粉含活孢子1億以上,在蔬菜上噴粉。
4、將病死的昆蟲屍體收集研磨,配成每毫升含活孢子1億以上(每100個蟲屍加工後,兌水80-100公斤)即可在蔬菜上噴霧。
5、松毛蟲:用孢子150~180萬億個,可直接對水噴霧。也可將菌粉與防治松毛蟲的化學殺蟲劑的粉劑如敵百蟲混合,使含孢1億/g,用混合粉22.5~30kg/hm2。也可採集發病死亡蟲屍,放到松林中,擴大染病面積。
6、防治玉米螟可向喇叭口撒顆粒劑(按1:10與煤渣混合),每株約2g,或灌菌液。
油懸浮劑可用超低量噴霧。
注意事項
(1)養蠶區不宜使用。(2)菌液配好後要於2小時內用完,以免過早萌發而失去侵染能力,顆粒劑也應隨用隨拌。不能與化學殺菌劑混用。(3)貯存在陰涼乾燥處。(4)人體接觸過多,有時會產生過敏性反應,出現低燒,皮膚刺癢等,施用時注意皮膚的防護。(5) 不能與化學殺菌劑混用。