生物文庫技術

作 者:邵寧生,楊光,房濤 主編
出 版 社:軍事醫學科學出版社
出版時間:2011-10-1
版 次:1
頁 數:144
字 數:170000
印刷時間:2011-10-1
開 本:16開
紙 張:膠版紙
印 次:1
I S B N:9787802450691
包 裝:平裝

內容簡介

本書的作者經過多年努力,建立和改良了多種噬菌體展示SELEX技術平台,並利用上述技術平台開展了針對感染、炎症、腫瘤和生物毒素等方面的新型診斷或治療藥物以及基礎方面的研究,取得了良好的結果。此書是根據作者實際工作經驗,結合具體篩選實例編寫而成,特別編入作者的經驗借鑑與注意事項,為讀者提供了較詳盡的參考技術路線和具體操作方法,儘量使具有一定生物化學和分子生物學實驗基礎的科技人員能夠快速掌握噬菌體展示和SELEX技術。本書由邵寧生、楊光等編著。

目錄

上篇 噬菌體表面展示技術原理及其操作指南
第1章 概述
一、噬菌體表面展示隨機肽庫
二、噬菌體抗體庫
三、噬菌體表面展示技術篩選原理和基本方法
四、噬菌體表面展示技術的套用
第2章 噬菌體表面展示肽庫技術操作指南
一、試劑
二、實驗步驟
三、影響篩選的因素
四、結果判斷和分析
第3章 噬菌體肽庫構建及篩選實例
實例1 基於昆蟲防禦素A蛋白分子的噬菌體展示構象肽庫的構建
實例2 重組hTNF-α結合肽的篩選
實例3 馬抗SARS-CoV多抗抗原表位的篩選
第4章 噬菌體抗體庫技術操作指南
一、試劑
二、實驗步驟
三、影響篩選的因素
第5章 噬菌體抗體庫構建及篩選實例
一、引物
二、淋巴細胞總RNA的提取及VH和VL基因的擴增
三、初級噬菌體抗體庫的構建
四、通過CRE-loxP位點特異性重組構建大容量噬菌體抗體庫
五、噬菌體抗體庫的篩選
六、噬菌體抗體的鑑定及序列分析
下篇 SELEX技術原理及其操作指南
第1章 概述
一、SELEX技術的基本技術路線
二、SELEX篩選的特點
三、SELEX的套用
四、適配子的改造
第2章 SELEX技術操作指南
一、試劑與設備
二、文庫/文庫模板和引物的設計與合成
三、RNA文庫的獲得(PCR、體外轉錄與RNA回收)
四、文庫與靶分子孵育
五、結合寡核苷酸分子的分離
六、反轉錄
七、PCR
八、下一輪篩選用文庫的製備
九、重複篩選
十、篩選後獲得的特異aptamer的分析
第3章 SELEX技術篩選實例
實例1 牛凝血酶特異的RNA aptamer的篩選
實例2 CE-SELEX篩選技術
實例3 親和層析SELEX篩選促紅細胞生成素適配體及基於分子信標檢測方法的建立
實例4 親和層析SELEX篩選相思子毒素適配體及其在分析檢測中的套用
實例5 以完整細胞為靶的消減SELEX篩選
實例6 腫瘤組織切片-SELEX技術篩選臨床標本分子探針
實例7 組合aptamer用於金黃色葡萄球菌檢測的研究

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