使用方法
瑞氏（Wright's stain；美藍－伊紅Y）染色：
1．瑞氏染料是由鹼性染料美藍（Methvlem blue）和酸性染料黃色伊紅（Eostm Y）合稱伊紅美藍染料即瑞氏（美藍－伊紅Y）染料。
2．用甲醇作瑞氏染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：
（1）甲醇使瑞氏染料中美藍（M）與伊紅（E）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。
甲 醇
ME（瑞氏染料）----→M+ + E-
在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘美藍就可以使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
（2）甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。
染液配製
(1) 瑞氏染液配製：
瑞氏染料 830gm或1g
甲醇（AR） 500ml或600ml
○先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著。
○再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重複數次，至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口。
○存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存3個月以上為佳。
(2) 緩衝液：
●緩衝液作用：
○染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察pH值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。
○緩衝液須保持一定的pH使染色穩定，PBS的pH 一般在6.4~6.8，
○偏鹼性染料可與緩衝液中酸基起中和作用，偏酸性染料則與緩衝液中的鹼基起中和作用，使pH恆定。
緩衝液配製
（pH6.4~6.8，弱酸性）：
配方1 ： 配方2：
1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml
1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O(新鮮) 加至1000ml
置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。
姬姆薩（Giemsa's stain；天青-伊紅）染色
1．姬姆薩染料是伊紅(AzurII Eqsin)和天青（藍）2號合成的。
2．姬姆薩染料（ Giemsa, 天青-伊紅）染液配製：
姬姆薩染料（粉末） 0.5g或7.5g
甲醇（AR） 33ml 或500ml
甘油（AR） 33ml或 500ml
●先將姬姆薩染料放入乳缽中，逐漸倒甘油研磨溶於甘油中，置於56℃水溫箱內，90～120分鐘，然後加入甲醇，搖勻後放置數天，過濾後或不過濾即可使用。此染液放置室溫陰暗處，時間越長越好。
●使用染液可臨時配置）：姬姆薩染液1ml，加DDH2O10ml混勻。即可使用。
染色步驟
（1）先用甲醇固定2～3分鐘。
（2）將血或骨髓塗片放置姬姆薩使用液15～30分鐘。
（3）塗片用自來水沖洗，在室溫中乾燥待查。
染液鑑定
瑞氏或姬姆薩染色液鑑定：剛配好或放置一個月以上的染液可進行下列鑑定：
1．取1滴染液於乳白玻板上，自行迅速擴散開，其顏色變紫紅色，且有偽足形成。
2．取1滴染液加1滴緩衝液，染液由深藍色立即變為紫紅色。
3．取血片或骨髓片進行試染檢查，觀察染色後各類細胞的胞核、胞漿及顆粒著色情況，pH是否合適及染色合適時間。如有上述變化，表明染液合格，可供使用。
混合染色
瑞氏染色(Wright's)-姬姆薩（Giemsa's）混合染色：
●瑞氏染色的染料配方濃度對細胞核著色程度適中,細胞核結構和色澤清晰艷麗,對核結構的識別較佳,但對胞漿著色偏酸,色澤偏紅,對細胞漿內顆粒特別是嗜天青顆粒及嗜中性顆粒著色較差。
●姬姆薩染色對胞漿著色能較好的顯示胞漿的嗜鹼性程度,特別對嗜天青、嗜酸性、嗜鹼性顆粒著色較清晰, 色澤純正,而對胞核著色偏深,核結構顯示較差。
●故採用以瑞氏染液為主，姬姆薩染液為輔的混合染色。
染色步驟:
1. 先用瑞氏染液將塗膜面充分覆蓋；
2. 稍等片刻再加姬姆薩染液2-3滴加減(根據塗片上細胞多少及增升程度酌情而定)；
3. 稍等1-2分鐘後,再加磷酸鹽緩衝液,加時應緩慢地一滴一滴加在塗片膜上,直至膜面上染色液形成表面張力而終止染色液加入；
4. 染色30-40分鐘；
5. 分色：用自來水緩緩衝洗至少3分鐘以上,待乾，勿用濾紙吸乾,以免濾紙纖維污染塗片。
