濾紙圓片法

濾紙圓片法

人體經常攝入低劑量的抗生素殘留物,經過一定時間後,會逐漸在體內蓄積而導致各種器官發生病變,甚至癌變,某些過敏體質個體對有些藥物的敏感性比一般個體高,即使接觸很少的殘留藥物也會引起變態反應,如經常飲用含低劑量抗生素的牛乳,會使人由於反覆受到抗生素的刺激而被致敏,濾紙圓片法就是一種檢測牛乳中是否摻有抗生素的檢測方法。

實驗器與藥品

滅菌鑷子,滅菌蒸餾水,菌種保存培養基(酵母浸汁2g,肉汁1 g,蛋白5g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL),增菌培養基(酵母浸汁1g,胰蛋白腖2g,葡萄糖0.05g,蒸餾水100mL,pH 8.0±0.1,120℃,20min滅菌),試驗用瓊脂平板培養基(酵母浸汁2.5g,胰蛋白腖5g,葡萄糖1 g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,pH 7.0±0.1,120℃,20min滅菌),試驗用菌(將 B.calicolactis C93菌種用增菌培養基55℃±1℃培養16~18h後與瓊脂平板培養基),55℃加熱(溶解),1:5比例混合,然後傾入預先加熱至55℃的平皿中,厚度為0.8~1.0mm供當日使用,如裝入塑膠袋中冷凍保存,可供數日使用,濾紙圓片(直徑為12~13mm和8~10mm)。

操作方法

用滅菌鑷子夾住濾紙片浸入乳樣中(事先要混合均勻)去掉多餘的乳,放在平板上,用鑷子輕輕按實,然後將平皿倒置於55℃溫箱中,培養2.5~5h,取出觀察濾紙片周圍有無抑菌環出現,有抑菌環證明有抗生素存在,如定量可用配製不同濃度的抗生素標準液的抑菌環大小做比較,本法對青黴素檢出濃度為0.05~0.025 I.U/mL。

抑菌環測量時,包括濾紙片直徑在內。

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