滇型雜交稻恢復系分子輔助選擇的方法

1一種滇型雜交稻恢復系分子輔助選擇的方法,保持目前粳稻恢復系選育的田 間栽培方式,種植材料之間的株距、行距和密度、田間的栽培管理、種子的 繁殖方法均與常規方法相同,其步驟是： 1)將待鑑定材料播種及移栽種植； 2)移栽15-40天取葉片,提取水稻總DNA； 3)測定樣品DNA濃度並將DNA定量稀釋為25ng/ul； 4)然後用位於水稻第10染色體的且與滇型恢復基因緊密連鎖的微衛星標記 OSR33、RM228作引物,進行PCR反應； 5)聚丙烯醯胺凝膠電泳； 6)銀染法檢測PCR產物及電泳結果； 7)用微衛星標記OSR33、RM228作引物時,含恢復基因,可作恢復系材料 的PCR產物的分子量分別是320bp,250bp；不能作滇型雜交稻恢復系的材 料,其PCR產物的分子量為330bp、270bp,由此鑑定待測材料有無恢復 基因,能否作滇型雜交稻的恢復系。