永久裝片切片——生物體上切取的薄片製成；
裝片——從生物體上撕取或挑取的材料製成；
塗片——液體的生物材料塗抹而成．這三種都可以製成永久的和臨時的。
簡介
永久裝片和臨時裝片製作過程基本一致，只是在染色時需要預先將材料染色，且需防止材料中的細胞脫水變形，所以需要進行封片——用加拿大的樹膠密封載玻片和蓋玻片，防止水分蒸發。
值得注意的是，所有永久裝片製作時都要將材料浸在生理鹽水中，目的是保持細胞的形態。
具體操作
這裡介紹一種常用的石蠟切片的製作方法：
1.取材 應根據要求選取材料來源及部位。例如植物細胞有絲分裂多選取洋蔥根尖，細胞分裂快又便於切取；豬的肝小葉邊界清晰明確；耳蝸以豚鼠的內耳易於定位和剝離。材料必須新鮮，擱置時間過久則產生蛋白質分解變性，導致細胞自溶及細菌的滋生，而不能反映組織活體時的形態結構。
2.固定 用適當的化學藥液——固定液浸漬切成小塊的新鮮材料，迅速凝固或沉澱細胞和組織中的物質成分、終止細胞的一切代謝過程、防止細胞自溶或組織變化，儘可能保持其活體時的結構。固定能使組織硬化，有利於切片的進行，而且也有媒浸作用，有利於組織著色。固定液的用量通常為材料塊的20倍左右，固定時間則根據材料塊的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以從1小時至數天，通常為數小時至24小時。
3.洗滌與脫水 固定後的組織材料需除去留在組織內的固定液及其結晶沉澱，否則會影響以後的染色效果。多數用流水沖洗；使用含有苦味酸的固定液固定的則需用酒精多次浸洗；如果組織經酒精或酒精混合液固定，則不必洗滌，可直接進行脫水。固定後或洗滌後的組織內充滿水分，如不除去水分就無法進行以後的透明、浸蠟與包埋，因為透明劑多數是苯類，苯類和石蠟均不能與水相融合，水分不脫盡，苯類不能浸入。酒精為常用脫水劑，它既能與水相混合，又能與透明劑相混，為了減少組織材料的急劇收縮，應使用從低濃度到高濃度遞增的順序進行，通常從30％或50％酒精開始，經70％、85％、95％直至純酒精（無水乙醇），每次時間為1～數小時，如不能及時進行各級脫水，材料可以放在70％酒精中保存，因高濃度酒精易使組織收縮硬化，不宜處理過久。正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陸環等也可做脫水劑。
4.透明 純酒精不能與石蠟相溶，還需用能與酒精和石蠟相溶的媒浸液，替換出組織內的酒精。材料塊在這類媒浸液中浸漬，出現透明狀態，此液即稱透明劑，透明劑浸漬過程稱透明。常用的透明劑有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等，各種透明劑均是石蠟的溶劑。通常組織先經純酒精和透明劑各半的混合液浸漬1～2小時，再轉入純透明劑中浸漬。透明劑的浸漬時間則要根據組織材料塊大小及屬於囊腔抑或實質器官而定。如果透明時間過短，則透明不徹底，石蠟難於浸入組織；透明時間過長，則組織硬化變脆，就不易切出完整切片。
5.浸蠟與包埋 用石蠟取代透明劑，使石蠟浸入組織而起支持作用。通常先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時，再先後移入2個熔化的石蠟液中浸漬3小時左右，浸蠟應在高於石蠟熔點3℃左右的溫箱中進行，以利石蠟浸入組織內。浸蠟後的組織材料塊放在裝有蠟液的容器中（擺好在蠟中的位置），待蠟液表層凝固即迅速放入冷水中冷卻，即做成含有組織塊的蠟塊。容器可用光亮且厚的紙摺疊成紙盒或金屬包埋框盒。如果包埋的組織塊數量多，應進行編號，以免差錯。石蠟熔化後應在蠟箱內過濾後使用，以免因含雜質而影響切片質量，且可能損傷切片刀。通常石蠟採用熔點為56～58℃或60～62℃兩種，可根據季節及操作環境溫度來選用。
6.切片 包埋好的蠟塊用刀片修成規整的方形或長方形，以少許熱蠟液將其底部迅速貼附於小木塊上，夾在輪轉式切片機的蠟塊鉗內，使蠟塊切面與切片刀刃平行，鏇緊。切片刀的銳利與否、蠟塊硬度適當都直接影響切片質量，可用熱水或冷水等方法適當改變蠟塊硬度。通常切片厚度為4～7微米，切出一片一片的蠟帶。
7.貼片與烤片 用粘附劑將展平的蠟片牢附於載玻片上，以免在以後的脫蠟、水化及染色等步驟中二者滑脫開。粘附劑是明膠。首先在潔淨的載玻片上塗抹薄層明膠，再將一定長度蠟帶（連續切片）或用刀片斷開成單個蠟片於溫水（45℃左右）中展平後，撈至玻片上鋪正，或直接滴兩滴蒸餾水於載玻片上，再把蠟片放於水滴上，略加溫使蠟片鋪展，最後用濾紙吸除多餘水分，將載玻片放入45℃溫箱中乾燥，也可在37℃溫箱中乾燥，但需適當延長時間。
8.切片脫蠟及水化 乾燥後的切片需脫蠟及水化才能在水溶性染液中進行染色。用二甲苯脫蠟，再逐級經純酒精及梯度酒精直至蒸餾水。如果染料配製於酒精中，則將切片移至與酒精近似濃度時，即可染色。
9.染色 染色的目的是使細胞組織內的不同結構呈現不同的顏色以便於觀察。未經染色的細胞組織其折光率相似，不易辨認。經染色可顯示細胞內不同的細胞器及內含物以及不同類型的細胞組織。染色劑種類繁多，應根據觀察要求及研究內容採用不同的染色劑及染色方法，還要注意選用適宜的固定劑才能取得滿意的結果。經典的蘇木精（Hematoxylin）和伊紅（曙紅，Eosin）染色法是組織學標本及病理切片標本的常規染色，簡稱HE染色。經HE染色後，細胞核被蘇木精染成紫藍色，多數細胞質及非細胞成分被伊紅染成粉紅色。由於蘇木精是帶陽離子的染料，染液呈鹼性，核內染色質及胞質核心糖體等物質對這種染料有親和性，稱嗜鹼性；而帶陰離子的染料伊紅配製的染液呈酸性，對這種染料的親和性，稱嗜酸性。有時不同的組織結構還需要用特殊的染料及染色方法加以顯示，稱特殊染色。有些細胞組織經硝酸銀浸潤後，可使溶液中銀離子還原成金屬銀或銀粒附著在細胞組織上，呈棕黑色，這種性質稱親銀性，而有些細胞組織本身不能使硝酸銀的銀離子還原成金屬銀，還需加還原劑才能將銀離子還原，稱嗜銀性。
10.切片脫水、透明和封片 染色後的切片尚不能在顯微鏡下觀察，需經梯度酒精脫水，在95％及純酒精中的時間可適當加長以保證脫水徹底；如染液為酒精配製，則應縮短在酒精中的時間，以免脫色。二甲苯透明後，迅速擦去材料周圍多餘液體，滴加適量（1～2滴）中性樹膠，再將潔淨蓋玻片傾斜放下，以免出現氣泡，封片後即製成永久性玻片標本，在光鏡下可長期反覆觀察。
