尿素酶(Urease)試驗
有些細菌能產生尿素酶,將尿素分解、產生2個分子的氨,使培養基變為鹼性,酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導酶,因為不論底物尿素是否存在,細菌均能合成此酶。其活性最適pH為7.0。試驗方法:挑取18~24h待試菌培養物大量接種於液體培養基管中,搖均,於36±1℃培養10,60和120min,分別觀察結果。或塗布並穿刺接種於瓊脂斜面,不要到達底部,留底部作變色對照。培養2,4和24h分別觀察結果,如陰性應繼續培養至4天,作最終判定,變為粉紅色為陽性。
快速尿素酶試驗
臨床上用以測定胃部(通常為胃竇、胃體)活檢組織中的尿素酶的定性試驗。是診斷消化道幽門螺桿菌感染的重要診斷指標。需要在胃鏡下取胃黏膜組織後進行,是侵入性檢測幽門螺桿菌的首選方法,具有操作簡便、費用低的優點。1984年科學家發現幽門螺桿菌一個重要特徵是能夠產生釋放大量的尿素酶,其尿素酶的酶活性是目前已知細菌所產尿素酶活性中最高的。尿素酶對幽門螺桿菌自身具有保護作用,它能水解尿素,生成氨氣和二氧化碳,氨氣能在幽門螺桿菌體周圍形成保護性“氨雲”,中和胃酸,是局部的pH升高,便於細菌定植致病。根據這一原理,Marshall等人設計了快速尿素酶試驗用於診斷幽門螺桿菌感染。 檢驗試劑中含尿素、pH指示劑、防腐劑和緩衝劑,可製成試液、瓊脂和紙片等。活檢取樣通常在胃竇,為提高敏感性亦可在胃體夾取一塊組織,標本放置於世紀後觀察顏色變化,判斷結果,時間在30分鐘至24小時之間,視試劑性能而定。pH指示劑在酸性條件下,酚紅呈黃褐色,若試劑顏色由黃褐色變成紅色或紫紅色,判為陽性,若不變則判為陰性。此法特別適合在基層單位開展,準確定達90%以上,是目前臨床上最常用的診斷方法。