hat培養基

hat培養基

1964年Littlefield首先發明了HAT(H—Hypoxanthine次黃嘌呤,A—Aminopterin甲氨喋呤,T——Thymidine胸腺嘧啶核苷)培養基的選擇培養。HAT選擇性培養基是根據次黃嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸生物合成途徑設計的。

HAT培養基

HAT培養基也就是指含有這三種物質的細胞培養基。對具有合成DNA原料的核苷酸的形成上,在細胞內具有起始合成途徑(denovopathway)和中間合成途徑(salvagepa-thway)。由於氨基蝶呤可阻礙起始合成途徑,所以培養基中含有它時,細胞便只有中間合成途徑,所以必須供給核苷酸。至於缺失中間合成途徑的細胞,可失去增殖能力臻於死亡。根據這一點,不僅把混存於細胞群中的正常細胞,通過試管內培養進行選擇,例如嘌呤的中間合成途徑缺失株和嘧啶的中間合成途徑缺失株,由於可以互補,所以兩者的雜種細胞,即使在氨基蝶呤的存在條件下也可以增殖。在這種情況下,利用HAT培養基可對雜種細胞進行選擇。次黃嘌呤和胸腺嘧啶脫氧核苷可作為中間合成途徑的原料而進行添加。
單克隆抗體技術中也要選擇有用的雜種細胞(即能產生抗體,又能無限傳代)

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